●Majukwaa:Illumina Novaseq 6000 na Novaseq X Plus
●Njia za kufuata:PE150 na PE250
●Udhibiti wa ubora wa maktaba kabla ya mpangilio
●Kuweka data QC na Uwasilishaji:Uwasilishaji wa Ripoti ya QC na Takwimu Mbichi katika Fomati ya Fastq Baada ya DeMultiplexing na Kuchuja Q30 inasoma
●Uwezo wa huduma za mpangilio:Mteja anaweza kuchagua mlolongo kwa njia, kiini cha mtiririko, au kwa idadi ya data inayohitajika (sehemu ya njia ya njia).
●Uzoefu mkubwa kwenye jukwaa la mpangilio wa Illumina:na maelfu ya miradi iliyofungwa na spishi anuwai.
●Uwasilishaji wa mpangilio wa Ripoti ya QC:Na metriki bora, usahihi wa data na utendaji wa jumla wa mradi wa mpangilio.
●Mchakato wa mpangilio wa kukomaa:na wakati mfupi wa kugeuka.
●Udhibiti wa ubora wa hali ya juu: Tunatumia mahitaji madhubuti ya QC ili kuhakikisha utoaji wa matokeo ya hali ya juu.
Jukwaa | Kiini cha mtiririko | Njia ya kufuata | Sehemu | Pato linalokadiriwa |
Novaseq x | 10b (vichochoro 8) | PE150 | Njia moja Njia ya sehemu | 375gb / njia |
25b (vichochoro 8) | PE150 | Njia moja Njia ya sehemu | 1000 GB/njia | |
Novaseq 6000 | Kiini cha mtiririko wa SP (vichochoro 2) | PE250 | Kiini cha mtiririko Njia moja Njia ya sehemu | 325-400 m inasoma / njia |
Kiini cha mtiririko wa S4 (vichochoro 4) | PE150 | Kiini cha mtiririko Njia moja Njia ya sehemu | ~ 800 GB / Lane |
Kiasi cha data (x) | Mkusanyiko (qPCR/nM) | Kiasi | |
Utaratibu wa njia ya sehemu
| X ≤ 10 GB | ≥ 1 nm | ≥ 25 μl |
10 GB <x ≤ 50 GB | ≥ 2 nm | ≥ 25 μl | |
50 GB <x ≤ 100 GB | ≥ 3 nm | ≥ 25 μl | |
X> 100 GB | ≥ 4 nm | ≥ 25 μl | |
Njia ya Njia | Kwa njia | ≥ 1.5 nm / dimbwi la maktaba | ≥ 25 μl / dimbwi la maktaba |
Mbali na mkusanyiko na jumla, muundo mzuri wa kilele pia unahitajika.
Kumbuka: Njia ya mpangilio wa maktaba za utofauti wa chini inahitaji Spike-in ili kuhakikisha wito wa msingi wa nguvu.
Tunapendekeza kuwasilisha maktaba zilizowekwa kabla kama sampuli. Ikiwa unahitaji BMKGENE kufanya maktaba ya maktaba, tafadhali rejelea
Mahitaji ya maktaba ya mpangilio wa njia ya sehemu.
Peak kuu inapaswa kuwa ndani ya 300-450 bp.
Maktaba zinapaswa kuwa na kilele kuu moja, hakuna uchafu wa adapta na hakuna vipimo vya primer.
Ripoti juu ya ubora wa maktaba hutolewa kabla ya mpangilio, kukagua kiasi cha maktaba, na kugawanyika.
Jedwali 1. Takwimu juu ya data ya mpangilio.
Mfano wa kitambulisho | Bmkid | RAW inasoma | Takwimu mbichi (BP) | Safi inasoma (%) | Q20 (%) | Q30 (%) | GC (%) |
C_01 | BMK_01 | 22,870,120 | 6,861,036,000 | 96.48 | 99.14 | 94.85 | 36.67 |
C_02 | BMK_02 | 14,717,867 | 4,415,360,100 | 96.00 | 98.95 | 93.89 | 37.08 |
Kielelezo 1. Usambazaji wa ubora pamoja unasoma katika kila sampuli
Kielelezo 2. Usambazaji wa Yaliyomo
Kielelezo 3. Usambazaji wa yaliyomo katika data ya kufuata