● Azimio: 100 µm
● kipenyo cha doa: 55 µm
● Idadi ya matangazo: 4992
● eneo la kukamata: 6.5 x 6.5 mm
● Kila mahali pa barcoded imejaa primers zilizo na sehemu 4:
- Poly (DT) mkia wa priming ya mRNA na awali ya cDNA
- Kitambulisho cha kipekee cha Masi (UMI) kusahihisha upendeleo wa kukuza
- Barcode ya anga
- Mlolongo wa kufunga wa sehemu ya kusoma 1 ya mpangilio
● H&E Madoa ya sehemu
●Huduma ya kusimamisha moja: inajumuisha uzoefu wote na hatua za msingi wa ustadi, pamoja na sehemu ya cryo, madoa, utaftaji wa tishu, barcoding ya anga, utayarishaji wa maktaba, mpangilio na bioinformatics.
● Timu ya ufundi yenye ustadi mkubwa: Pamoja na uzoefu katika aina zaidi ya 250 za tishu na spishi 100+ pamoja na binadamu, panya, mamalia, samaki na mimea.
●Sasisho la wakati halisi kwenye mradi mzima: na udhibiti kamili wa maendeleo ya majaribio.
●Kiwango kamili cha bioinformatics:Kifurushi ni pamoja na uchambuzi 29 na takwimu 100 za ubora wa juu.
●Uchambuzi wa data uliobinafsishwa na taswira: Inapatikana kwa maombi tofauti ya utafiti.
●Uchambuzi wa pamoja wa hiari na mlolongo wa seli moja mRNA
Mahitaji ya mfano | Maktaba | Mkakati wa mpangilio | Takwimu zilizopendekezwa | Udhibiti wa ubora |
Sampuli za Cryo-zilizoingizwa za Oct (Kipenyo bora: takriban. 6x6x6 mm³) Vitalu 2 kwa sampuli | Maktaba ya 10x Visium cDNA | Illumina PE150 | 50k PE inasoma kwa kila doa (60gb) | Rin> 7 |
Kwa maelezo zaidi juu ya mwongozo wa maandalizi ya mfano na utiririshaji wa huduma, tafadhali jisikie huru kuzungumza na aMtaalam wa BMKGENE
Katika awamu ya utayarishaji wa mfano, jaribio la uchimbaji wa RNA ya kwanza linafanywa ili kuhakikisha kuwa RNA ya hali ya juu inaweza kupatikana. Katika hatua ya uboreshaji wa tishu sehemu hizo zimebadilishwa na kuonyeshwa na hali ya upenyezaji wa kutolewa kwa mRNA kutoka kwa tishu huboreshwa. Itifaki iliyoboreshwa basi inatumika wakati wa ujenzi wa maktaba, ikifuatiwa na mpangilio na uchambuzi wa data.
Utiririshaji kamili wa huduma unajumuisha sasisho za wakati halisi na uthibitisho wa mteja ili kudumisha kitanzi cha majibu ya msikivu, kuhakikisha utekelezaji wa mradi laini.
Ni pamoja na uchambuzi ufuatao:
Udhibiti wa ubora wa data:
o Pato la data na usambazaji wa alama ya ubora
o Ugunduzi wa jeni kwa kila doa
o chanjo ya tishu
Uchambuzi wa mfano wa ndani:
o Utajiri wa jeni
o Spot nguzo, pamoja na uchambuzi wa mwelekeo uliopunguzwa
o Uchambuzi wa kujieleza tofauti kati ya vikundi: Utambulisho wa jeni za alama
o Kufanya kazi kwa ufafanuzi na utajiri wa jeni la alama
Uchambuzi wa kikundi
o Kujumuisha tena matangazo kutoka kwa sampuli zote mbili (kwa mfano. Wagonjwa na kudhibiti) na nguzo tena
o Utambulisho wa jeni la alama kwa kila nguzo
o Kufanya kazi kwa ufafanuzi na utajiri wa jeni la alama
o Tofauti ya kujieleza ya nguzo moja kati ya vikundi
Uchambuzi wa mfano wa ndani
Spot nguzo
Kitambulisho cha jeni na usambazaji wa anga
Uchambuzi wa kikundi
Mchanganyiko wa data kutoka kwa vikundi vyote na nguzo tena
Aina za alama za nguzo mpya
Chunguza maendeleo yaliyowezeshwa na Huduma ya Transcripttomics ya BMKGENE na 10x Visium katika machapisho haya yaliyoangaziwa:
Chen, D. et al. .Utaratibu wa Chuo cha kitaifa cha Sayansi ya Merika, 120 (30), p. E2303462120. doi: /10.1073/pnas.2303462120
Chen, Y. et al. .Maelezo mafupi katika bioinformatics, 24 (2), uk. 1-10. Doi: 10.1093/bib/bbad068.
Liu, C. et al. .Utafiti wa asidi ya nuklia, 50 (17), Uk. 9724-9737. Doi: 10.1093/nar/gKAC773.
Wang, J. et al. .Jarida la Kimataifa la Sayansi ya Biolojia, 19 (8), Uk. 2515-2530. Doi: 10.7150/ijbs.83510.