● sintésis cDNA tina poly-A mRNA dituturkeun ku persiapan perpustakaan
● Sequencing dina modeu CCS, ngahasilkeun HiFi maca
● Sequencing tina transkrip pinuh-panjangna
● Analisis teu merlukeun génom rujukan; kumaha oge, eta bisa jadi padamelan
● Analisis bioinformatik ngamungkinkeun analisis transkrip isoform lncRNA, fusi gén, poli-adénilasi, jeung struktur gén
●Akurasi Luhur: HiFi maca kalawan akurasi> 99,9% (Q30), comparable mun NGS
● Analisis Splicing Alternatif: sequencing sakabéh transkrip ngamungkinkeun idéntifikasi jeung characterization isoform
●Kaahlian éksténsif: kalawan catetan lagu completing leuwih 1100 PacBio pinuh-panjangna transcriptome proyék jeung ngolah leuwih 2300 sampel, tim kami brings kabeungharan pangalaman ka unggal proyék.
●Rojongan Post-Penjualan: komitmen urang ngalegaan saluareun parantosan proyék kalawan 3-bulan periode jasa sanggeus-diobral. Salila ieu, kami nawiskeun nurutan proyék, bantuan ngungkulan, sareng sesi Q&A pikeun ngajawab patarosan naon waé anu aya hubunganana sareng hasil.
Perpustakaan | Strategi sequencing | Data disarankeun | Kontrol kualitas |
PolyA enriched perpustakaan mRNA CCS | PacBio Sequel II PacBio Revio | 20/40 Gb 5/10 M CCS | Q30≥85% |
Nukléotida:
● Tutuwuhan:
Akar, Batang atanapi Petal: 450 mg
Daun atawa Siki: 300 mg
Buah: 1,2 g
● Sasatoan:
Jantung atawa peujit: 300 mg
Viscera atanapi Otak: 240 mg
Otot: 450 mg
Tulang, Rambut atawa Kulit: 1g
● Artropoda:
Serangga: 6g
Crustacea: 300 mg
● Getih sakabeh: 1 pipah
● Sél: 106 sél
Conc.(ng/μl) | Jumlah (μg) | Kasucian | Integritas |
≥ 100 | ≥ 1.0 | OD260/280 = 1,7-2,5 OD260 / 230 = 0,5-2,5 Kawates atanapi henteu aya kontaminasi protéin atanapi DNA anu dipidangkeun dina gél. | Pikeun tutuwuhan: RIN≥7.5; Pikeun sato: RIN≥8.0; 5.0≥ 28S/18S≥1.0; kawates atawa euweuh élévasi dasar |
Wadahna: 2 ml centrifuge tube (Timah foil teu dianjurkeun)
Sampel panyiri: Grup + ulangan misalna A1, A2, A3; B1, B2, B3.
Pangiriman:
1. Garing-és: Sampel kudu dipak dina kantong jeung dikubur di garing-és.
2. tabung RNAstable: sampel RNA bisa garing dina tube stabilisasi RNA (misalna RNAstable®) jeung shipped dina suhu kamar.
Ngawengku analisis di handap ieu:
● kadali kualitas data atah
● Analisis Poliadénilasi Alternatif (APA)
● Analisis transkrip fusi
● Analisis Splicing Alternatif
● Analisis Patokan Universal Single-Copy Orthologs (BUSCO).
● Analisis transkrip novel: prediksi runtuyan coding (CDS) jeung annotation fungsi
● analisis lncRNA: prediksi lncRNA jeung target
● Idéntifikasi MicroSatelite (SSR)
analisis BUSCO
Analisis Splicing Alternatif
Analisis Poliadénilasi Alternatif (APA)
Anotasi fungsional transkrip novel
Jelajahi kamajuan anu difasilitasi ku BMKGene's Nanopore's full-length mRNA sequencing services in this featured publication.
Ma, Y. dkk. (2023) 'Analisis komparatif PacBio na ONT RNA sequencing métode pikeun idéntifikasi venom Nemopilema Nomurai', Genomics, 115 (6), p. 110709. doi: 10.1016/J.YGENO.2023.110709.
Chao, Q. et al. (2019) 'Dinamika perkembangan Populus stem transcriptome', Plant Biotéhnologi Journal, 17 (1), pp. 206-219. doi: 10.1111/PBI.12958.
Deng, H. et al. (2022) 'Robah Dinamis dina Eusi Asam Askorbat salila Pangwangunan Buah jeung Ripening of Actinidia latifolia (hiji Ascorbate-Beunghar Buah Pamotongan) jeung Mékanisme Molekul Pakait', International Journal of Élmu Molekul, 23(10), p. 5808. doi: 10.3390 / IJMS23105808 / S1.
Hua, X. dkk. (2022) 'Prediksi éféktif gén jalur biosintétik aub dina polyphyllins bioaktif di Paris polyphylla', Biologi Komunikasi 2022 5: 1, 5 (1), pp. 1-10. doi: 10.1038 / s42003-022-03000-z.
Liu, M. et al. (2023) 'Gabungan PacBio Iso-Seq sareng Illumina RNA-Seq Analisis tina Tuta absoluta (Meyrick) Transkriptom sareng Cytochrome P450 Gén', Serangga, 14 (4), p. 363. doi: 10.3390/SERUNGA14040363/S1.
Wang, Lijun et al. (2019) 'A survey pajeulitna transcriptome maké PacBio molekul tunggal analisis real-time digabungkeun jeung Illumina RNA sequencing pikeun pamahaman hadé tina biosintésis asam ricinoleic di Ricinus communis', BMC Genomics, 20 (1), pp. 1-17. Doi: 10.1186 / S12864-019-5832-9.