● آر اين اي نموني جي پروسيسنگ ۾ شامل آهي rRNA جي گھٽتائي پٺيان هدايت واري آر اين اي لائبريري جي تياري.
● بايو انفارميٽڪ تجزيا هڪ ريفرنس جينوم کي ترتيب ڏيڻ جي بنياد تي
● تجزيي ۾ جين جو اظهار ۽ DEGs شامل آهن پر ٽرانسڪرپٽ ڍانچي ۽ sRNA تجزيو پڻ
●سخت معيار ڪنٽرول: اسان سڀني مرحلن تي بنيادي ڪنٽرول پوائنٽس تي عمل ڪندا آهيون، نموني ۽ لائبريري جي تياري کان وٺي ترتيب ڏيڻ ۽ بايو انفارميٽڪس تائين. هي محتاط نگراني مسلسل اعلي معيار جي نتيجن جي پهچائڻ کي يقيني بڻائي ٿي.
●Strand-specific Sequencing ڊيٽاآر اين اي لئبريري جي تياري جي ڪري هدايتڪاري، انٽي سينس ٽرانسڪرپٽس جي سڃاڻپ کي فعال ڪرڻ جي ڪري.
●مڪمل تجزيو Prokaryotic Transscriptomes جي مطابقبائيو انفارميٽيڪل پائپ لائن ۾ شامل آهي نه رڳو جين جي اظهار جو تجزيو پر ٽرانسڪرپٽ ڍانچي جو تجزيو پڻ شامل آهي، بشمول آپريٽرن جي سڃاڻپ، UTRs ۽ پروموٽر. ان ۾ sRNAs جو تجزيو پڻ شامل آھي، يعني ثانوي ڍانچي ۽ ھدف جي تشريح ۽ اڳڪٿي.
●پوسٽ-سيلز سپورٽ: اسان جي وابستگي پروجيڪٽ جي مڪمل ٿيڻ کان اڳتي وڌي ٿي 3-مهيني بعد-سيل سروس جي مدت سان. هن وقت دوران، اسان پيش ڪريون ٿا پروجيڪٽ جي پيروي ڪرڻ، مشڪلاتن جي حل ۾ مدد، ۽ سوال ۽ جواب سيشن نتيجن سان لاڳاپيل ڪنهن به سوالن کي حل ڪرڻ لاء.
لائبريري | ترتيب واري حڪمت عملي | سفارش ٿيل ڊيٽا | معيار ڪنٽرول |
rRNA ختم ٿيل هدايت واري لائبريري | Illumina PE150 | 1-2 جي بي | Q30≥85% |
اتفاق (ng/μl) | رقم (μg) | پاڪائي | سالميت |
≥ 50 | ≥ 1 | OD260/280=1.8-2.0 OD260/230=1.0-2.5 جيل تي ڏيکاريل محدود يا ڪو پروٽين يا ڊي اين اي آلودگي. | RIN≥6.5 |
ڪنٽينر: 2 ml سينٽرفيوج ٽيوب (ٽين ورق جي سفارش نه ڪئي وئي آهي)
نموني ليبلنگ: گروپ + نقل ڪريو مثال طور A1، A2، A3؛ B1، B2، B3.
ترسيل:
1. خشڪ برف: نمونن کي بيگز ۾ ڀريل ۽ خشڪ برف ۾ دفن ڪرڻ جي ضرورت آهي.
2. RNAstable tubes: RNA جا نمونا RNA اسٽيبلائيزيشن ٽيوب (مثال طور RNAstable®) ۾ خشڪ ڪري سگھجن ٿا ۽ ڪمري جي گرمي پد تي موڪليا وڃن ٿا.
ھيٺ ڏنل تجزيو شامل آھي:
● خام ڊيٽا معيار ڪنٽرول
● ريفرنس جينوم کي ترتيب ڏيڻ
● لائبريري جي معيار جو جائزو: آر اين اي فرگمينٽيشن بي ترتيب، داخل سائيز ۽ ترتيب جي سنترپشن
● اڳڪٿي ڪيل ڪوڊنگ جينز جي فنڪشنل تشريح
● اظهار جو تجزيو: لاڳاپو ۽ پرنسپل اجزاء جو تجزيو (PCA)
● فرق جين اظهار (DEGs)
● فنڪشنل تشريح ۽ DEGs جي افزودگي
● sRNA تجزيو: اڳڪٿي، تشريح، ٽارگيٽ، ۽ ثانوي جوڙجڪ اڳڪٿي
● ٽرانسڪرپٽ ڍانچي جو تجزيو: آپريشنز، شروعاتي ۽ ختم ٿيڻ واريون پوزيشنون، اڻ ترجمو ٿيل علائقو (UTS)، پروموٽر، ۽ SNP/InDel تجزيو
تسلسل سنترپتي
ڪوڊنگ جين جي فنڪشنل تشريح
نموني جي وچ ۾ لاڳاپو
اختلافي اظهار ڪيل جينس (DEGs) تجزيو
فنڪشنل افزودگي جو تجزيو
sRNA تشريح
هن نمايان اشاعت ۾ BMKGene جي نانوپور مڪمل ڊگھائي mRNA ترتيب ڏيڻ جي خدمتن پاران سهولتن جي ترقيءَ جي ڳولا ڪريو.
گوان، سي پي وغيره. (2018) 'Global Transscriptome Changes of Biofilm-forming Staphylococcus epidermidis Responsing to Total Alkaloids of Sophorea alopecuroides'،پولش جرنل آف مائڪروبيولوجي، 67 (2)، ص. 223. doi: 10.21307/PJM-2018-024.