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Sequenciamento de Amplicon 16S/18S/ITS-PacBio

Os genes 16S e 18S rRNA, juntamente com a região Internal Transcribed Spacer (ITS), servem como marcadores de impressão digital molecular essenciais devido à sua combinação de regiões altamente conservadas e hipervariáveis, tornando-os ferramentas inestimáveis ​​para caracterizar organismos procarióticos e eucarióticos. A amplificação e o sequenciamento dessas regiões oferecem uma abordagem livre de isolamento para investigar a composição microbiana e a diversidade em vários ecossistemas. Embora o sequenciamento da Illumina normalmente tenha como alvo regiões hipervariáveis ​​curtas, como V3-V4 de 16S e ITS1, foi demonstrado que a anotação taxonômica superior é alcançável pelo sequenciamento de todo o comprimento de 16S, 18S e ITS. Esta abordagem abrangente resulta em percentagens mais elevadas de sequências classificadas com precisão, alcançando um nível de resolução que se estende à identificação de espécies. A plataforma de sequenciamento em tempo real de molécula única (SMRT) da PacBio se destaca por fornecer leituras longas (HiFi) altamente precisas que cobrem os amplicons completos, rivalizando com a precisão do sequenciamento da Illumina. Esta capacidade permite aos investigadores obter uma vantagem incomparável – uma visão panorâmica da paisagem genética. A cobertura estendida eleva significativamente a resolução na anotação de espécies, particularmente em comunidades bacterianas ou fúngicas, permitindo uma compreensão mais profunda dos meandros das populações microbianas.


Detalhes do serviço

Bioinformática

Resultados de demonstração

Publicações em destaque

Recursos de serviço

● Plataforma de sequenciamento: PacBio Revio

● Modo de sequenciamento: CCS (leituras HiFi)

● Amplificação da região alvo seguida de ligação em tandem de amplicons antes da preparação da biblioteca de sinos HiFi SMRT

Vantagens do serviço

Maior resolução taxonômica: Tsequenciamento de amplicon curto han,permitindo taxas de classificação OTU mais altas em nível de espécie.

Chamada de base altamente precisa: Sequenciamento do modo PacBio CCS (leituras HiFi).

Livre de isolamento: Identificação rápida da composição microbiana em amostras ambientais.

Amplamente aplicável: Diversos estudos de comunidades microbianas.

Análise bioinformática abrangente: O mais recente pacote QIIME2 (visão quantitativa da ecologia microbiana) com diversas análises em termos de banco de dados, anotação, OTU/ASV.

Ampla experiência: Com milhares de projetos de sequenciamento de amplicons realizados anualmente, a BMKGENE traz mais de uma década de experiência, uma equipe de análise altamente qualificada, conteúdo abrangente e excelente suporte pós-venda.

Especificações de serviço

Biblioteca

Estratégia de sequenciamento

Dados recomendados

Amplicão

PacBio Revisão

30/10/50 mil tags (CCS)

Requisitos de amostra

Concentração (ng/µL)

Quantidade total (µg)

Volume (µL)

≥5

≥0,3

≥20

Entrega de amostra recomendada

Congele as amostras em nitrogênio líquido por 3-4 horas e armazene em nitrogênio líquido ou -80 graus para reserva de longo prazo. É necessário enviar amostras com gelo seco.

Fluxo de trabalho de serviço

entrega de amostra

Entrega de amostra

Preparação da Biblioteca

Construção de biblioteca

Sequenciamento

Sequenciamento

Análise de dados

Análise de dados

Serviços pós-venda

Serviços pós-venda


  • Anterior:
  • Próximo:

  • 流程图第三版2-02

    Inclui a seguinte análise:

    ●Controle de qualidade de dados brutos

    ● Clustering/eliminação de ruído de OTU (ASV)

    ● Anotação OTU

    ●Análise de diversidade alfa: múltiplos índices, incluindo Shannon, Simpson e ACE.

    ●Análise de diversidade beta

    ●Análise intergrupo

    ●Análise de correlação: entre fatores ambientais e composição e diversidade OUT

    ●Predição do gene funcional 16S

     

    Histograma de distribuição taxonômica

    Foto 57

    Árvore filogenética de distribuição comunitária

    Foto 58

    Análise de diversidade alfa: ACE

    índiceFoto 59

     

    Análise de diversidade beta: PCoA

    60 fotos

     

    Análise intergrupo: ANOVA

    Foto 61

     

     

     

    Explore os avanços facilitados pelos serviços de sequenciamento de amplicons da BMKGene com PacBio por meio de uma coleção selecionada de publicações.

    Gao, X. e Wang, H. (2023) 'Análise comparativa de perfis e funções bacterianas do rúmen durante a adaptação a diferentes fenologia (Regreen vs. Grassy) em ovelhas Merino alpinas com dois estágios de crescimento em um prado alpino', Fermentação, 9 ( 1), pág. 16. doi: 10.3390/FERMENTAÇÃO9010016/S1.

    Li, S. et al. (2023) 'Capturando a matéria escura microbiana em solos desérticos usando metagenômica baseada em culturômica e análise de alta resolução', npj Biofilms and Microbiomes 2023 9:1, 9(1), pp. doi: 10.1038/s41522-023-00439-8.

    Mu, L. et al. (2022) 'Efeitos dos sais de ácidos graxos nas características de fermentação, diversidade bacteriana e estabilidade aeróbica de silagem mista preparada com alfafa, palha de arroz e farelo de trigo', Journal of the Science of Food and Agriculture, 102(4), pp. 1487. doi: 10.1002/JSFA.11482.

    Yang, J. et al. (2023) 'A interação entre biomarcadores de estresse oxidativo e microbiota intestinal nos efeitos antioxidantes de extratos de Sonchus brachyotus DC. em Estresse Oxidativo Intestinal Induzido por Oxazolona em Zebrafish Adulto', Antioxidantes 2023, Vol. 12, página 192, 12(1), p. 192.doi:10.3390/ANTIOX12010192.

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