● Sekwenzar fuq Novaseq ma 'PE150.
● Preparazzjoni tal-librerija b'kodifika doppja, li tippermetti ġabra ta 'aktar minn 1000 kampjun.
● Din it-teknika tista 'tintuża bi jew mingħajr ġenoma ta' referenza, b'papi bijoinformatiċi differenti għal kull każ:
Bil-ġenoma ta 'referenza: SNP u indel Discovery
Mingħajr Ġenoma ta 'Referenza: Kampjun ta' raggruppament u skoperta ta 'SNP
● Fil-fis-silicoStadju ta 'qabel id-disinn ta' kombinazzjonijiet ta 'enzimi ta' restrizzjoni multipla huma skrinjati biex isibu dawk li jiġġeneraw distribuzzjoni uniformi ta 'tikketti SLAF tul il-ġenoma.
● Matul l-esperiment ta 'qabel, tliet kombinazzjonijiet ta' enzimi huma ttestjati fi 3 kampjuni biex jiġġeneraw 9 libreriji SLAF, u din l-informazzjoni hija użata biex tagħżel l-aħjar kombinazzjoni ta 'enzimi ta' restrizzjoni għall-proġett.
●Skoperta ta 'markatur ġenetiku għoli: L-integrazzjoni ta 'sistema ta' barcode doppja b'rendiment għoli tippermetti s-sekwenzar simultanju ta 'popolazzjonijiet kbar, u amplifikazzjoni speċifika għal locus ittejjeb l-effiċjenza, u tiżgura li n-numri tat-tikketta jissodisfaw ir-rekwiżiti varji ta' diversi mistoqsijiet ta 'riċerka.
● Dipendenza baxxa fuq il-ġenoma: Jista 'jiġi applikat għal speċi bi jew mingħajr ġenoma ta' referenza.
●Disinn ta 'skema flessibbli: Enzima waħda, enzima doppja, diġestjoni multi-enzima, u tipi varji ta 'enzimi kollha jistgħu jintgħażlu biex jilqgħu għal għanijiet jew speċi ta' riċerka differenti. Ilfis-silicoId-disinn minn qabel jitwettaq biex jiżgura disinn ta 'enzima ottimali.
● Effiċjenza għolja fid-diġestjoni enżimatika: Il-konduzzjoni ta 'fis-silicoDisinn minn qabel u disinn ta 'qabel l-esperiment assigurati b'disistribuzzjoni uniformi ta' tikketti SLAF fuq il-kromożoma (1 tag SLAF / 4KB) u sekwenza ripetittiva mnaqqsa (<5%).
●Kompetenza estensiva: It-tim tagħna jġib ħafna esperjenza għal kull proġett, b'rekord ta 'għeluq ta' aktar minn 5000 proġett SLAF-Seq fuq mijiet ta 'speċi, inklużi pjanti, mammiferi, għasafar, insetti, u organiżmi akwatiċi.
● Fluss tax-xogħol bijoinformatiku żviluppat minnu nnifsu: BMKGene żviluppa fluss ta 'xogħol bijoinformatiku integrat għal SLAF-Seq biex jiżgura l-affidabbiltà u l-eżattezza tal-produzzjoni finali.
Tip ta 'analiżi | Skala tal-Popolazzjoni Rakkomandata | Strateġija ta 'sekwenzar | |
Fond tas-sekwenzar tat-tikketti | Numru tat-tikketta | ||
Mapep ġenetiċi | 2 ġenituri u> 150 frieħ | Ġenituri: 20x WGS Offsping: 10x | Daqs tal-ġenoma: <400 MB: WGS huwa rrakkomandat <1GB: 100K Tags 1-2GB :: 200K tags > 2GB: 300K Tags Tags Max 500K |
Studji ta 'Assoċjazzjoni Madwar il-Ġenoma (GWAS) | ≥200 kampjun | 10x | |
Evoluzzjoni ġenetika | ≥30 kampjun, b '> 10 kampjuni minn kull sottogrupp | 10x |
Konċentrazzjoni ≥ 5 ng / µl
Ammont totali ≥ 80 ng
Nanodrop OD260 / 280 = 1.6-2.5
Agarose Gel: NO jew degradazzjoni jew kontaminazzjoni limitata
Kontenitur: 2 ml centrifuge tubu
(Għal ħafna mill-kampjuni, nirrakkomandaw li ma nippreservawx fl-etanol)
Tikkettar tal-Kampjun: Il-kampjuni jeħtieġ li jkunu ttikkettjati b'mod ċar u identiċi għall-formola ta 'informazzjoni tal-kampjun sottomessa.
Ġarr: Silġ niexef: Il-kampjuni jeħtieġ li jiġu ppakkjati f'boroż l-ewwel u midfuna f'iklejka niexfa.
Immappjar għall-ġenoma ta 'referenza
Mingħajr ġenoma ta 'referenza: raggruppament
Distribuzzjoni ta 'tikketti SLAF fuq kromożomi:
Distribuzzjoni ta 'SNPs fuq kromożomi:
Sena | Ġurnal | IF | Titlu | Applikazzjonijiet |
2022 | Komunikazzjonijiet tan-Natura | 17.694 | Bażi Ġenomika tal-Giga-Kromosomi u Giga-Ġenoma ta 'Siġra Peony Paeonia ostii | Slaf-Gwas |
2015 | Phytologist ġdid | 7.433 | Impronti domestikazzjoni ankra reġjuni ġenomiċi ta 'importanza agronomika fi Sojja | Slaf-Gwas |
2022 | Il-Ġurnal ta ’Riċerka Avvanzata | 12.822 | Introgressjonijiet artifiċjali tal-ġenoma kollha ta 'Gossypium Barbadense f'G. Hirsutum jiżvelaw loci superjuri għal titjib simultanju tal-kwalità u r-rendiment tal-fibra tal-qoton karatteristiċi | Ġenetika Evoluzzjonarja Slaf |
2019 | Impjant molekulari | 10.81 | Analiżi ġenomika tal-popolazzjoni u assemblaġġ de novo jiżvelaw l-oriġini tal-ħaxix Ross bħala logħba evoluzzjonarja | Ġenetika Evoluzzjonarja Slaf |
2019 | Ġenetika tan-Natura | 31.616 | Sekwenza tal-ġenoma u diversità ġenetika tal-karpjun komuni, Cyprinus carpio | Mappa tal-Linkage Slaf |
2014 | Ġenetika tan-Natura | 25.455 | Il-ġenoma tal-karawett ikkultivat tipprovdi ħarsa lejn il-karyotipi tal-legumi, poliploid Evoluzzjoni u domestikazzjoni tal-għelejjel. | Mappa tal-Linkage Slaf |
2022 | Ġurnal tal-bijoteknoloġija tal-pjanti | 9.803 | L-identifikazzjoni ta 'ST1 tiżvela għażla li tinvolvi l-hitchhiking tal-morfoloġija taż-żerriegħa u kontenut taż-żejt waqt id-domestikazzjoni tas-sojja | Żvilupp tal-markatur tal-slaf |
2022 | Ġurnal Internazzjonali tax-Xjenzi Molekulari | 6.208 | Identifikazzjoni u Żvilupp tal-Marker tad-DNA għal Wheat-Leymus Mollis 2NS (2D) Sostituzzjoni disomika tal-kromożomi | Żvilupp tal-markatur tal-slaf |
Sena | Ġurnal | IF | Titlu | Applikazzjonijiet |
2023 | Frontiers fix-Xjenza tal-Pjanti | 6.735 | Immappjar QTL u analiżi tat-traskrizzjoni tal-kontenut taz-zokkor waqt il-maturazzjoni tal-frott ta 'pirus pyrifolia | Mappa ġenetika |
2022 | Ġurnal tal-bijoteknoloġija tal-pjanti | 8.154 | L-identifikazzjoni ta 'ST1 tiżvela għażla li tinvolvi l-hitchhiking tal-morfoloġija taż-żerriegħa u l-kontenut taż-żejt waqt id-domestikazzjoni tas-sojja
| SNP Sejħa |
2022 | Frontiers fix-Xjenza tal-Pjanti | 6.623 | Immappjar ta 'assoċjazzjoni mal-ġenoma ta' hulless bilkemm fenotipi f'ambjent ta 'nixfa.
| Gwas |