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제품

전장 mRNA 시퀀싱 -Pacbio

NGS 기반 mRNA 시퀀싱은 유전자 발현을 정량화하기위한 다재다능한 도구이지만, 짧은 판독 값은 복잡한 전 사체 분석에서의 사용을 제한한다. 반면에, Pacbio 시퀀싱 (ISO-Seq)은 긴 읽기 기술을 사용하여 전장 mRNA 전 사체의 시퀀싱을 가능하게합니다. 이 접근법은 대안 적 스 플라이 싱, 유전자 융합 및 폴리 아일 닐화의 포괄적 인 탐색을 용이하게한다. 그러나, 많은 양의 데이터로 인해 유전자 발현 정량화에 대한 다른 선택이있다. Pacbio 시퀀싱 기술은 단일 분자, 실시간 (SMRT) 시퀀싱에 의존하여 전장 mRNA 전 사체를 캡처 할 때 뚜렷한 이점을 제공합니다. 이 혁신적인 접근법은 제로 모드 도파관 (ZMW)과 시퀀싱 동안 DNA 폴리머 라제 활성의 실시간 관찰을 가능하게하는 미세 가재 된 웰을 사용하는 것입니다. 이들 ZMW 내에서, Pacbio의 DNA 폴리머 라제는 상보적인 DNA 가닥을 합성하여, mRNA 전 사체 전체에 걸쳐 긴 독서를 생성한다. 원형 컨센서스 시퀀싱 (CCS) 모드에서의 Pacbio 작동은 동일한 분자를 반복적으로 시퀀싱하여 정확도를 향상시킵니다. 생성 된 HIFI 판독은 NGS와 비슷한 정확도를 가지며 복잡한 전 사체 특징에 대한 포괄적이고 신뢰할 수있는 분석에 더 기여합니다.

플랫폼 : Pacbio 속편 II; Pacbio Revio


  • :
  • 서비스 세부 사항

    생물 정보학

    데모 결과

    추천 간행물

    특징

    ● Poly-A mRNA의 cDNA 합성 다음 라이브러리 제조

    ● CCS 모드에서 시퀀싱 Hifi 읽기를 생성합니다

    ● 전장 전 사체의 시퀀싱

    ● 분석은 기준 게놈을 필요로하지 않습니다. 그러나 사용될 수 있습니다

    ● 생물 정보 분석 분석은 전 사체 이소 형 LNCRNA, 유전자 융합, 폴리 아일 닐화 및 유전자 구조의 분석을 가능하게합니다.

    서비스 장점

    2

    높은 정확도: Hifi는 정확도로 읽습니다> 99.9% (Q30), NGS와 비슷합니다.

    ● 대체 스 플라이 싱 분석: 전체 전 사체의 시퀀싱은 이소 형 식별 및 특성을 가능하게합니다.

    광범위한 전문 지식: 1100 개가 넘는 Pacbio 전장 전사 프로젝트 프로젝트를 완료하고 2300 개가 넘는 샘플을 처리 한 기록을 통해 우리 팀은 모든 프로젝트에 풍부한 경험을 제공합니다.

    판매 후 지원: 우리의 약속은 3 개월간의 사후 서비스 기간으로 프로젝트 완료를 넘어 확장됩니다. 이 기간 동안 우리는 프로젝트 후속 조치, 문제 해결 지원 및 Q & A 세션을 제공하여 결과와 관련된 쿼리를 해결합니다.

    샘플 요구 사항 및 전달

    도서관

    시퀀싱 전략

    데이터가 권장됩니다

    품질 관리

    Polya 농축 mRNA CCS 라이브러리

    Pacbio 속편 II

    Pacbio Revio

    20/40GB

    5/10 m CCS

    Q30 ≥85%

    샘플 요구 사항 :

    뉴클레오티드 :

    ● 식물 :

    뿌리, 줄기 또는 꽃잎 : 450 mg

    잎 또는 씨앗 : 300 mg

    과일 : 1.2 g

    ● 동물 :

    심장 또는 장 : 300 mg

    내장 또는 뇌 : 240 mg

    근육 : 450 mg

    뼈, 모발 또는 피부 : 1g

    ● 절지 동물 :

    곤충 : 6g

    갑각류 : 300 mg

    ● 전혈: 1 튜브

    ● 셀 : 106 세포

     

    conc. (ng/μl)

    양 (μg)

    청정

    진실성

    ≥ 100

    ≥ 1.0

    OD260/280 = 1.7-2.5

    OD260/230 = 0.5-2.5

    겔에 표시된 단백질 또는 DNA 오염이 제한적이거나 없음.

    식물의 경우 : RIN≥7.5;

    동물의 경우 : RIN≥8.0;

    5.0 이상 28S/18S+1.0;

    기준선 높이가 제한적이거나 없음

    권장 샘플 전달

    컨테이너: 2ml 원심 분리 튜브 (주석 호일 권장되지 않음)

    샘플 라벨링 : 그룹+복제 EG A1, A2, A3; B1, B2, B3.

    선적:

    1. 드라이 아이스 : 샘플은 가방에 포장되어 드라이 아이스에 묻어 야합니다.

    2. RNASTable 튜브 : RNA 샘플은 RNA 안정화 튜브 (예 : RNastable®)에서 건조시키고 실온으로 선적 될 수 있습니다.

    서비스 작업 흐름

    샘플 QC

    실험 설계

    샘플 전달

    샘플 전달

    파일럿 실험

    RNA 추출

    도서관 준비

    도서관 건설

    시퀀싱

    시퀀싱

    데이터 분석

    데이터 분석

    판매 후

    애프터 판매 서비스


  • 이전의:
  • 다음:

  • -Pacbio-Only-01

    다음 분석을 포함합니다.

    ● 원시 데이터 품질 관리

    ● 대안 폴리아 데 닐화 분석 (APA)

    ● 퓨전 전사 분석

    ● 대체 스 플라이 싱 분석

    ● 벤치마킹 Universal Single-Copy Orthologs (Busco) 분석

    ● 새로운 전사 분석 : 코딩 시퀀스 (CDS) 및 기능성 주석의 예측

    ● LNCRNA 분석 : lncRNA 및 표적의 예측

    ● Microsatelite 식별 (SSR)

    Busco 분석

     

     26

     

    대체 스 플라이 싱 분석

    27

    대체 폴리아 데 닐화 분석 (APA)

     

     28

     

    새로운 전 사체의 기능적 주석

    29 

    이 특집 간행물에서 BMKGENE의 나노 포어 전장 mRNA 시퀀싱 서비스에 의해 촉진 된 발전을 탐구하십시오.

     

    Ma, Y. et al. (2023) 'Nemopilema nomurai venom 식별을위한 Pacbio 및 Ont RNA 시퀀싱 방법의 비교 분석', Genomics, 115 (6), p. 110709. doi : 10.1016/j.ygeno.2023.110709.

    Chao, Q. et al. (2019) 'Populus 줄기 전 사체의 발달 역학', Plant Biotechnology Journal, 17 (1), pp. 206–219. doi : 10.1111/pbi.12958.

    Deng, H. et al. (2022) 'Actinidia latifolia (아스 코르 베이트가 풍부한 과일 작물) 및 관련 분자 메커니즘의 과일 발달 및 숙성 동안'아스코르브 산 함량의 역동적 인 변화 ', International Journal of Molecular Sciences, 23 (10), p. 5808. doi : 10.3390/ijms23105808/s1.

    Hua, X. et al. (2022) 파리 폴리 필라에서 생물 활성 폴리 필린에 관여하는 생합성 경로 유전자의 효과적인 예측 ', Communications Biology 2022 5 : 1, 5 (1), pp. 1-10. doi : 10.1038/s42003-022-03000-z.

    Liu, M. et al. (2023) 'Tuta Absoluta (Meyrick) Transcriptome 및 Cytochrome P450 유전자의 Pacbio Iso-Seq 및 Illumina RNA-seq 분석, 곤충, 14 (4), p. 363. doi : 10.3390/곤충 14040363/s1.

    Wang, Lijun et al. (2019) 'Ricinus Communis의 리시 노산 생합성을 더 잘 이해하기 위해 Illumina RNA 시퀀싱과 결합 된 Pacbio 단일 분자 실시간 분석을 사용한 전 사체 복잡성에 대한 조사', BMC Genomics, 20 (1), pp. 1-17. doi : 10.1186/s12864-019-5832-9.

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