● Jupuk mRNA poli-A banjur sintesis cDNA lan persiapan perpustakaan
● Urutan transkrip lengkap
● Analisis bioinformatika adhedhasar keselarasan karo genom referensi
● Analisis bioinformatika kalebu ora mung ekspresi ing tingkat gen lan isoform nanging uga analisis lncRNA, fusi gen, poli-adenilasi lan struktur gen
●Kuantifikasi ekspresi ing tingkat isoform: mbisakake analisis ekspresi sing rinci lan akurat, mbukak owah-owahan sing bisa ditutupi nalika nganalisa ekspresi gen kabeh
●Panjaluk Data Suda:Dibandhingake karo Next-Generation Sequencing (NGS), Nanopore sequencing nuduhake syarat data sing luwih murah, ngidini tingkat jenuh kuantifikasi ekspresi gen sing padha karo data sing luwih cilik.
●Akurasi kuantitas ekspresi sing luwih dhuwur: ing tingkat gen lan isoform
●Identifikasi informasi transkriptomi tambahan: poliadenilasi alternatif, gen fusi lan lcnRNA lan gen target
●Keahlian ekstensif: Tim kita ndadekke kasugihan saka pengalaman kanggo saben project, wis rampung liwat 850 Nanopore proyek transcriptome lengkap lan diproses liwat 8,000 conto.
●Dhukungan Post-Sales: prasetya kita ngluwihi proyek rampung kanthi wektu layanan sawise-sale 3 sasi. Sajrone wektu iki, kita nawakake tindak lanjut proyek, pitulungan ngatasi masalah, lan sesi Q&A kanggo ngatasi pitakon apa wae sing ana gandhengane karo asil.
Pustaka | Strategi urutan | Data dianjurake | Kontrol kualitas |
Poly A enriched | Illumina PE 150 Kab | 6/12 Gb | Skor kualitas rata-rata: Q10 |
Konk.(ng/μl) | Jumlah (μg) | Kemurnian | Integritas |
≥ 100 | ≥ 1.0 | OD260/280=1.7-2.5 OD260/230=0,5-2,5 Kontaminasi protein utawa DNA diwatesi utawa ora ditampilake ing gel. | Kanggo tetanduran: RIN≥7.0; Kanggo kewan: RIN≥7.5; 5.0≥28S/18S≥1.0; winates utawa ora elevasi baseline |
● Tanduran:
ROOT, Batang utawa Petal: 450 mg
Godhong utawa Wiji: 300 mg
Woh: 1,2 g
● Kewan:
Jantung utawa Usus: 300 mg
Viscera utawa Otak: 240 mg
Otot: 450 mg
Balung, Rambut utawa Kulit: 1g
● Artropoda:
serangga: 6 g
Crustacea: 300 mg
● Getih wutuh: 1 tub
● Sel: 106 sel
Wadah: 2 ml tabung centrifuge (Timah foil ora dianjurake)
Labeling sampel: Group+replikat contone A1, A2, A3; B1, B2, B3.
Kintunan:
1. Es garing: Sampel kudu dikemas ing tas lan dikubur ing es garing.
2. Tabung RNAstable: Sampel RNA bisa dikeringake ing tabung stabilisasi RNA (umpamane RNAstable®) lan dikirim ing suhu kamar.
● Pangolahan data mentah
● Identifikasi transkrip
● splicing alternatif
● Kuantifikasi ekspresi ing tingkat gen lan tingkat isoform
● Analisis ekspresi diferensial
● Anotasi lan pengayaan fungsi (DEG lan DET)
Analisis splicing alternatif Analisis Poliadenilasi Alternatif (APA)
prediksi lncRNA
Anotasi gen novel
Clustering saka DETs
Jaringan Protein-Protein ing DEGs
Jelajahi kemajuan sing difasilitasi dening layanan urutan mRNA lengkap Nanopore BMKGene liwat koleksi publikasi sing dipilih.
Gong, B. et al. (2023) 'Aktivasi epigenetik lan transkripsi saka kinase secretory FAM20C minangka onkogen ing glioma', Jurnal Genetika lan Genomik, 50 (6), pp. 422-433. doi: 10.1016/J.JGG.2023.01.008.
Dheweke, Z. et al. (2023) 'Urutan transkriptom lengkap limfosit nanggapi IFN-γ ngungkapake respon imun Th1-skewed ing flounder (Paralichthys olivaceus)', Imunologi Ikan & Kerang, 134, p. 108636. doi: 10.1016/J.FSI.2023.108636.
Ma, Y. et al. (2023) 'Analisis komparatif metode urutan PacBio lan ONT RNA kanggo identifikasi racun Nemopilema Nomurai', Genomics, 115 (6), p. 110709. doi: 10.1016/J.YGENO.2023.110709.
Yu, D. et al. (2023) 'Analisis nano-seq ngungkapake tendensi fungsional sing beda antarane exosomes lan microvesicles sing asale saka hUMSC', Stem Cell Research and Therapy, 14 (1), pp. 1-13. doi: 10.1186 / S13287-023-03491-5 / TABLES / 6.