Exclusive Agency for Korea

ọkọlọtọ-03

Ngwaahịa

Illumina emeburu ọba akwụkwọ

Teknụzụ usoro nke Illumina, dabere na Sequencing site Synthesis (SBS), bụ ihe ọhụrụ NGS nabatara n'ụwa niile, na-ahụ maka imepụta ihe karịrị 90% nke data usoro usoro ụwa. Ụkpụrụ nke SBS na-agụnye ịse foto n'ụdị fluorescent nke a na-akpọ reversible terminators ka agbakwunyere dNTP ọ bụla, ma mesịa kewaa iji kwe ka ntinye nke ntọala na-esote. N'ebe dNTP anọ niile na-atụgharị akwụsị akwụsị dị na usoro usoro nke ọ bụla, asọmpi eke na-ebelata mbuso agha. Teknụzụ a na-agbanwe agbanwe na-akwado ma ụlọ akwụkwọ ọbá akwụkwọ na-agụ otu na nke jikọtara ọnụ, na-enye ọtụtụ ngwa genomic. Ikike dị elu nke Illumina sequencing na nke ziri ezi tinye ya dị ka isi nkuku na nyocha nke genomics, na-enye ndị ọkà mmụta sayensị ike ka ha kpughee mgbagwoju anya nke genome nwere nkọwa na arụmọrụ enweghị atụ.

Ọrụ usoro ọba akwụkwọ anyị emeburu na-enyere ndị ahịa aka ịkwadebe ọba akwụkwọ usoro sitere na isi mmalite dị iche iche (mRNA, genome dum, amplicon, ọba akwụkwọ 10x, na ndị ọzọ). Mgbe nke ahụ gasịrị, enwere ike ibuga ọba akwụkwọ ndị a gaa na ebe a na-ahazi usoro anyị maka njikwa mma na nhazi usoro na nyiwe Illumina.


Nkọwa ọrụ

Nsonaazụ ngosi

Atụmatụ

Platform:Illumina NovaSeq 6000 na NovaSeq X Plus

Ụdị usoro:PE150 na PE250

Njikwa ogo nke ọba akwụkwọ tupu usoro

Usoro data QC na nnyefe:nnyefe nke akụkọ QC na data raw na usoro fastq mgbe demultiplexing na nzacha Q30 na-agụ

 

 

Uru ọrụ

Ọdịiche nke ọrụ usoro:onye ahịa nwere ike họrọ usoro n'usoro site n'okporo ụzọ, cell flow cell, ma ọ bụ site na ọnụọgụ data achọrọ (usoro nke akụkụ ụzọ).

Ahụmahụ dị ukwuu na ikpo okwu usoro usoro Illumina:na ọtụtụ puku ọrụ mechiri emechi nwere ụdị dị iche iche. 

Mbufe nke usoro QC akụkọ:ya na metrik dị mma, izi ezi data na ịrụ ọrụ n'ozuzu nke usoro nhazi.

Usoro usoro nke tozuru oke:na obere oge mgbanwe.

Njikwa ogo siri ike: anyị na-emejuputa iwu QC siri ike iji kwe nkwa ịnye nsonaazụ dị elu mgbe niile.

 

 

Ihe atụ Platform

Platform

Cell eruba

Usoro usoro

Nkeji

Mbupute echere

NovaSeq X

10B (ụzọ 8)

PE150

Otu ụzọ

Akụkụ akụkụ

375Gb / uzo

25B (ụzọ 8)

PE150

Otu ụzọ

Akụkụ akụkụ

1000 Gb/Ụdị

NovaSeq 6000

SP Flow cell (ụzọ abụọ)

PE250

Cell eruba

Otu ụzọ

Akụkụ akụkụ

325-400 M na-agụ / Lane

S4 Flow cell (ụzọ 4)

PE150

Cell eruba

Otu ụzọ

Akụkụ akụkụ

~ 800 Gb / uzo

Ihe atụ chọrọ

 

Ọnụ ego data (X)

Ntinye uche (qPCR/nM)

Olu

Usoro akụkụ akụkụ

 

 

X ≤ 10 Gb

≥1 nM

≥ 25 μl

10 Gb <X ≤ 50 Gb

≥2 nM

≥ 25 μl

50 Gb <X ≤ 100 Gb

≥3 nM

≥ 25 μl

X> 100 Gb

≥4 nM

≥ 25 μl

Usoro usoro

Kwa Lane

≥ 1.5 nM / ọdọ mmiri

≥ 25 μl / ọdọ mmiri

Na mgbakwunye na itinye uche na mkpokọta ego, a chọkwara ụkpụrụ kacha elu kwesịrị ekwesị.

Mara: Usoro nke ọba akwụkwọ dị iche iche dị ala chọrọ PhiX spike-in iji hụ na ọkpụkpọ ntọala siri ike.

Anyị na-akwado ịnyefe ọba akwụkwọ agbakọgoro dị ka ihe atụ. Ọ bụrụ na ịchọrọ BMKGENE ka ọ rụọ ikpokọta ọba akwụkwọ, biko rụtụ aka

chọrọ n'ọbá akwụkwọ maka usoro akụkụ akụkụ ụzọ.

Nha ọba akwụkwọ (maapụ kacha elu)

Ọnụ kacha elu kwesịrị ịdị n'ime 300-450 bp.
Ọbá akwụkwọ kwesịrị inwe otu ọnụ ọgụgụ kacha elu, enweghị mmetọ ihe nkwụnye na enweghị ihe nrịbama.

Biko kpọtụrụ anyị ma ọ bụrụ na nlele gị emezughị ihe mmalite ihe achọrọ.

Usoro ọrụ ọrụ

nkwadebe sample

Njikwa ogo ụlọ akwụkwọ

Usoro

Usoro

Nyocha data

Njikwa ogo data

Ihe atụ QC

Nnyefe oru ngo


  • Nke gara aga:
  • Osote:

  • Akụkọ ụlọ akwụkwọ QC

    A na-enye akụkọ maka ogo ụlọ akwụkwọ ahụ tupu usoro nhazi, nyochaa ego ọbá akwụkwọ, na nkewa.

     

    Usoro nke akụkọ QC

     

    Tebụl 1. Statistics na usoro data.

    NJ nlele

    BMKID

    Raw na-agụ

    Data raw (bp)

    Ọgụgụ dị ọcha (%)

    Q20(%)

    Q30(%)

    GC(%)

    C_01

    BMK_01

    22,870,120

    6,861,036,000

    96.48

    99.14

    94.85

    36.67

    C_02

    BMK_02

    14,717,867

    4,415,360,100

    96.00

    98.95

    93.89

    37.08

    Ọgụgụ 1. Ogo nkesa tinyere na-agụ na nke ọ bụla sample

    A9

    Ọgụgụ 2. Isi nkesa ọdịnaya

    A10

    Ọgụgụ 3. Nkesa nke ọdịnaya agụ na usoro data

    A11

     

    nweta ntinye okwu

    Dee ozi gị ebe a ziga anyị ya

    Zitere anyị ozi gị: