● Penangkapan mRNA poli-A diikuti oleh sintesis cDNA dan persiapan perpustakaan
● Urutan transkrip panjang penuh
● Analisis bioinformatik berdasarkan penyelarasan dengan genom referensi
● Analisis bioinformatik mencakup tidak hanya ekspresi pada gen dan tingkat isoform tetapi juga analisis lncRNA, fusi gen, poli-adenilasi dan struktur gen
●Kuantifikasi ekspresi pada tingkat isoform: Mengaktifkan analisis ekspresi yang terperinci dan akurat, meluncurkan perubahan yang mungkin ditutupi saat menganalisis seluruh ekspresi gen
●Mengurangi permintaan data:Dibandingkan dengan sequencing generasi berikutnya (NGS), sekuensing nanopore menunjukkan persyaratan data yang lebih rendah, memungkinkan tingkat setara saturasi kuantifikasi ekspresi gen dengan data yang lebih kecil.
●Akurasi kuantifikasi ekspresi yang lebih tinggi: baik pada tingkat gen dan isoform
●Identifikasi informasi transkriptomi tambahan: Polyadenylation alternatif, gen fusi dan lcnrna dan gen targetnya
●Keahlian yang luas: Tim kami membawa banyak pengalaman untuk setiap proyek, setelah menyelesaikan lebih dari 850 proyek transkriptome full-length nanopore dan memproses lebih dari 8.000 sampel.
●Dukungan pasca-penjualan: Komitmen kami melampaui penyelesaian proyek dengan periode layanan setelah penjualan 3 bulan. Selama waktu ini, kami menawarkan tindak lanjut proyek, bantuan pemecahan masalah, dan sesi tanya jawab untuk menangani setiap pertanyaan yang terkait dengan hasilnya.
Perpustakaan | Strategi Sequencing | Data direkomendasikan | Kontrol kualitas |
Poly A diperkaya | Illumina PE150 | 6/12 GB | Skor kualitas rata -rata: Q10 |
Conc. (Ng/μl) | Jumlah (μg) | Kemurnian | Integritas |
≥ 100 | ≥ 1.0 | OD260/280 = 1.7-2.5 OD260/230 = 0,5-2.5 Kontaminasi protein atau tidak ada protein atau DNA yang ditunjukkan pada gel. | Untuk tanaman: rin≥7.0; Untuk hewan: rin≥7.5; 5.0≥28S/18S≥1.0; ketinggian terbatas atau tidak ada |
● Tanaman:
Root, batang atau kelopak: 450 mg
Daun atau biji: 300 mg
Buah: 1.2 g
● Hewan:
Jantung atau usus: 300 mg
Viscera atau Brain: 240 mg
Otot: 450 mg
Tulang, Rambut atau Kulit: 1G
● Arthropoda:
Serangga: 6g
Crustacea: 300 mg
● Darah utuh: 1 tabung
● Sel: 106 sel
Wadah: 2 ml tabung centrifuge (timah tidak disarankan)
Label sampel: grup+replikasi misalnya A1, A2, A3; B1, B2, B3.
Pengiriman:
1. Es kering: Sampel perlu dikemas dalam kantong dan dikubur dalam es kering.
2. Tabung RNASTABLE: Sampel RNA dapat dikeringkan dalam tabung stabilisasi RNA (misalnya RNASTABLE®) dan dikirim dalam suhu kamar.
● Pemrosesan data mentah
● Identifikasi transkrip
● Penyambungan alternatif
● Kuantifikasi ekspresi dalam tingkat gen dan tingkat isoform
● Analisis ekspresi diferensial
● Anotasi dan pengayaan fungsi (DEG dan DET)
Analisis splicing alternatif Analisis Polyadenylation Alternatif (APA)
Prediksi lncRNA
Anotasi gen baru
Pengelompokan det
Jaringan protein-protein dalam DEG
Jelajahi kemajuan yang difasilitasi oleh layanan pengurutan mRNA nanopore full-length BMKGENE melalui koleksi publikasi yang dikuratori.
Gong, B. et al. (2023) 'Aktivasi epigenetik dan transkripsional dari sekretori kinase FAM20C sebagai onkogen dalam glioma', Journal of Genetics and Genomics, 50 (6), hlm. 422-433. doi: 10.1016/j.jgg.2023.01.008.
Dia, Z. et al. (2023) 'Sequencing transkriptome full-length limfosit merespons IFN-γ mengungkapkan respons imun TH1-steah pada flounder (Paralichthys olivaceus)', Imunologi Ikan & Kerang, 134, hlm. 108636. Doi: 10.1016/j.fsi.2023.108636.
Ma, Y. et al. (2023) 'Analisis komparatif metode sekuensing PACBIO dan ONT RNA untuk Identifikasi Venom Nemopilema Nomurai', Genomics, 115 (6), hal. 110709. Doi: 10.1016/j.ygeno.2023.110709.
Yu, D. et al. (2023) 'Analisis nano-seq mengungkapkan kecenderungan fungsional yang berbeda antara eksosom dan mikrovesikel yang berasal dari humsc', penelitian sel induk dan terapi, 14 (1), hlm. 1–13. doi: 10.1186/s13287-023-03491-5/Tabel/6.