Mode sekuensing | Ukuran perpustakaan | Data TeoritisHasil (per sel) | Single-baseKetepatan | Aplikasi |
Clr | 20kb, 30kb, dll. | 80 GB hingga 130 GB | Kira -kira. 85% | De novo, Panggilan sv, dll. |
CCS | 15-20 kb | 14 hingga 40 GB/sel (Sekuel II) 70 hingga 110 GB/sel (REVIO) Tergantung pada sampel | Kira -kira. 99% | De novo, Panggilan snp/indel/sv, iso-seq, |
Ketentuan | Sistem Sekuel II | Sistem Revio | Meningkatkan |
Kepadatan yang lebih tinggi | 8 juta ZMW | 25 juta ZMW | 3x |
Tahap independen | 1 | 4 | 4x |
Waktu lari yang lebih pendek | 30 jam | 24 jam | 1.25x |
30x genom manusia hifi / tahun | 88 | 1.300 | 15x secara keseluruhan |
● Lebih dari 8 tahun pengalaman pada platform sequencing Pacbio dengan ribuan proyek tertutup dengan berbagai spesies.
● Dilengkapi dengan platform sekuensing PACBIO terbaru, Revio untuk menjamin throughput sekuensing yang cukup.
● Waktu belokan yang lebih cepat, hasil data yang lebih tinggi dan data yang lebih akurat.
● Berkontribusi dalam ratusan publikasi berbasis Pacbio berdampak tinggi.
Jenis sampel | Jumlah | Konsentrasi (QUBIT®) | Volume | Kemurnian | Yang lain |
DNA genomik | Bergantung pada persyaratan data | ≥50 ng/μl | ≥15μl | OD260/280 = 1.7-2.2; OD260/230 = 1.8-2.5 ; Bersihkan puncak pada 260 nm,Tidak ada kontaminasi | Konsentrasi perlu diukur dengan qubit dan qubit/nanopore = 0,8-2.5 |
Total RNA | ≥1.2μg | ≥120 ng/μl | ≥15μl | OD260/280 = 1.7-2.5; OD260/230 = 0,5-2,5 ;Tidak ada kontaminasi | Nilai RIN ≥7.5 5≥28S/18S≥1 |
1. Hasil data di rumah
Data yang dihasilkan dari 63 sel CCS (dari 26 spesies)
DATA-Pacbio-ccs-15 kb | Rata-rata | Max | Min | Median |
Yield - Subreads (GB) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yiled - CCS (GB) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polimerase N50 | 145.651 | 175.430 | 118.118 | 144.689 |
Subreads N50 | 17.509 | 23.924 | 12.485 | 17.584 |
CCS N50 | 14.490 | 19.034 | 9.876 | 14.747 |
Rata-rata-polimerase | 67.995 | 89.379 | 49.664 | 66.433 |
Panjang Panjang Rata-rata | 15.866 | 21.036 | 11.657 | 16.012 |
Panjang rata-rata-ccs | 14.489 | 19.074 | 8.575 | 14.655 |
Data yang dihasilkan dari 16 sel CLR (dari 76 spesies)
Data-Pacbio-CLR-30KB | Rata-rata | Max | Min | Median |
Yield - Subreads (GB) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
Polimerase N50 | 39.456 | 121.191 | 15.389 | 35.231 |
Subreads N50 | 28.490 | 41.012 | 14.430 | 29.063 |
Rata-rata-polimerase | 22.063 | 48.886 | 8.747 | 21.555 |
Panjang Panjang Rata-rata | 17.720 | 27.225 | 8.293 | 17.779 |
2.Data QC - DemoStatistik tentang hasil data
Mencicipi | CCS membaca num | Total CCS Base (BP) | CCS membaca N50 (BP) | CCS rata -rata panjang (bp) | CCS Longest Read (BP) | Subreads Base (BP) | Tingkat CCS (%) |
PB_BMKXXX | 3.444.159 | 54.164.122.586 | 15.728 | 15.726 | 36.110 | 863.326.330.465 | 6.27 |