条形बैनर-03

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पूर्ण-लंबाई एमआरएनए अनुक्रमण -पैकबियो

जबकि एनजीएस-आधारित एमआरएनए अनुक्रमण जीन अभिव्यक्ति की मात्रा निर्धारित करने के लिए एक बहुमुखी उपकरण है, छोटी रीडिंग पर इसकी निर्भरता जटिल ट्रांसक्रिप्टोमिक विश्लेषण में इसके उपयोग को प्रतिबंधित करती है। दूसरी ओर, PacBio अनुक्रमण (Iso-Seq) लंबे समय तक पढ़ी जाने वाली तकनीक का उपयोग करता है, जो पूर्ण-लंबाई वाले mRNA प्रतिलेखों के अनुक्रमण को सक्षम बनाता है। यह दृष्टिकोण वैकल्पिक स्प्लिसिंग, जीन फ़्यूज़न और पॉली-एडिनाइलेशन की व्यापक खोज की सुविधा प्रदान करता है। हालाँकि, आवश्यक डेटा की उच्च मात्रा के कारण जीन अभिव्यक्ति परिमाणीकरण के लिए अन्य विकल्प भी हैं। PacBio अनुक्रमण तकनीक एकल-अणु, वास्तविक समय (SMRT) अनुक्रमण पर निर्भर करती है, जो पूर्ण-लंबाई mRNA प्रतिलेखों को कैप्चर करने में एक विशिष्ट लाभ प्रदान करती है। इस अभिनव दृष्टिकोण में शून्य-मोड वेवगाइड्स (जेडएमडब्ल्यू) और माइक्रोफैब्रिकेटेड कुओं का उपयोग शामिल है जो अनुक्रमण के दौरान डीएनए पोलीमरेज़ गतिविधि के वास्तविक समय अवलोकन को सक्षम बनाता है। इन ZMWs के भीतर, PacBio का डीएनए पोलीमरेज़ डीएनए के एक पूरक स्ट्रैंड को संश्लेषित करता है, जो लंबे समय तक पढ़ता है जो संपूर्ण mRNA प्रतिलेखों को फैलाता है। सर्कुलर कंसेंसस सीक्वेंसिंग (CCS) मोड में PacBio ऑपरेशन एक ही अणु को बार-बार अनुक्रमित करके सटीकता बढ़ाता है। जेनरेट की गई HiFi रीडिंग में NGS के बराबर सटीकता होती है, जो जटिल ट्रांसक्रिप्टोमिक विशेषताओं के व्यापक और विश्वसनीय विश्लेषण में योगदान देती है।

प्लेटफ़ॉर्म: पैकबियो सीक्वल II; पैकबियो रिवियो


  • :
  • सेवा विवरण

    बायोइनफॉरमैटिक्स

    डेमो परिणाम

    विशेष प्रकाशन

    विशेषताएँ

    ● लाइब्रेरी की तैयारी के बाद पॉली-ए एमआरएनए से सीडीएनए संश्लेषण

    ● सीसीएस मोड में अनुक्रमण, HiFi रीड उत्पन्न करना

    ● पूर्ण-लंबाई प्रतिलेखों का अनुक्रमण

    ● विश्लेषण के लिए संदर्भ जीनोम की आवश्यकता नहीं है; हालाँकि, इसे नियोजित किया जा सकता है

    ● जैव सूचनात्मक विश्लेषण प्रतिलेख आइसोफॉर्म एलएनसीआरएनए, जीन फ्यूजन, पॉली-एडिनाइलेशन और जीन संरचना के विश्लेषण को सक्षम बनाता है।

    सेवा लाभ

    2

    उच्च सटीकता: HiFi सटीकता के साथ पढ़ता है >99.9% (Q30), जो NGS के बराबर है

    ● वैकल्पिक स्प्लिसिंग विश्लेषण: संपूर्ण प्रतिलेखों का अनुक्रमण आइसोफॉर्म पहचान और लक्षण वर्णन को सक्षम बनाता है

    व्यापक विशेषज्ञता: 1100 से अधिक PacBio पूर्ण-लंबाई ट्रांसक्रिप्टोम परियोजनाओं को पूरा करने और 2300 से अधिक नमूनों को संसाधित करने के ट्रैक रिकॉर्ड के साथ, हमारी टीम हर परियोजना के लिए समृद्ध अनुभव लेकर आती है।

    बिक्री के बाद का समर्थन: हमारी प्रतिबद्धता 3 महीने की बिक्री-पश्चात सेवा अवधि के साथ परियोजना को पूरा करने से आगे तक फैली हुई है। इस समय के दौरान, हम परिणामों से संबंधित किसी भी प्रश्न के समाधान के लिए प्रोजेक्ट फॉलो-अप, समस्या निवारण सहायता और प्रश्नोत्तर सत्र की पेशकश करते हैं।

    नमूना आवश्यकताएँ और वितरण

    पुस्तकालय

    अनुक्रमण रणनीति

    डेटा अनुशंसित

    गुणवत्ता नियंत्रण

    पॉलीए समृद्ध एमआरएनए सीसीएस लाइब्रेरी

    पैकबियो सीक्वल II

    पैकबियो रिवियो

    20/40 जीबी

    5/10 एम सीसीएस

    Q30≥85%

    नमूना आवश्यकताएँ:

    न्यूक्लियोटाइड्स:

    ● पौधे:

    जड़, तना या पंखुड़ी: 450 मिलीग्राम

    पत्ती या बीज: 300 मिलीग्राम

    फल: 1.2 ग्राम

    ● पशु:

    दिल या आंत: 300 मिलीग्राम

    आंत या मस्तिष्क: 240 मिलीग्राम

    मांसपेशी: 450 मिलीग्राम

    हड्डियाँ, बाल या त्वचा: 1 ग्राम

    ● आर्थ्रोपोड:

    कीड़े: 6 ग्राम

    क्रस्टेशिया: 300 मिलीग्राम

    ● पूरा खून: 1 ट्यूब

    ● कोशिकाएं: 106 कोशिकाओं

     

    सांद्र(एनजी/μl)

    मात्रा (μg)

    पवित्रता

    अखंडता

    ≥ 100

    ≥ 1.0

    ओडी260/280=1.7-2.5

    ओडी260/230=0.5-2.5

    जेल पर सीमित या कोई प्रोटीन या डीएनए संदूषण नहीं दिखाया गया है।

    पौधों के लिए: RIN≥7.5;

    जानवरों के लिए: RIN≥8.0;

    5.0≥ 28S/18S≥1.0;

    सीमित या कोई आधारभूत उन्नयन नहीं

    अनुशंसित नमूना वितरण

    कंटेनर: 2 मिली सेंट्रीफ्यूज ट्यूब (टिन फ़ॉइल अनुशंसित नहीं है)

    नमूना लेबलिंग: समूह+प्रतिकृति जैसे A1, A2, A3; बी1, बी2, बी3.

    शिपमेंट:

    1. सूखी बर्फ: नमूनों को बैग में पैक करके सूखी बर्फ में दबा देना चाहिए।

    2. आरएनएस्टेबल ट्यूब: आरएनए नमूनों को आरएनए स्थिरीकरण ट्यूब (जैसे आरएनएस्टेबल®) में सुखाया जा सकता है और कमरे के तापमान में भेजा जा सकता है।

    सेवा कार्य प्रवाह

    नमूना QC

    प्रयोग डिज़ाइन

    नमूना वितरण

    नमूना वितरण

    पायलट प्रयोग

    आरएनए निष्कर्षण

    पुस्तकालय की तैयारी

    पुस्तकालय निर्माण

    अनुक्रमण

    अनुक्रमण

    डेटा विश्लेषण

    डेटा विश्लेषण

    बिक्री के बाद सेवाएँ

    बिक्री के बाद की सेवाएँ


  • पहले का:
  • अगला:

  • —-PacBio-केवल-01

    निम्नलिखित विश्लेषण शामिल है:

    ● कच्चा डेटा गुणवत्ता नियंत्रण

    ● वैकल्पिक पॉलीएडेनाइलेशन विश्लेषण (एपीए)

    ● संलयन प्रतिलेख विश्लेषण

    ● वैकल्पिक स्प्लिसिंग विश्लेषण

    ● बेंचमार्किंग यूनिवर्सल सिंगल-कॉपी ऑर्थोलॉग्स (बुस्को) विश्लेषण

    ● उपन्यास प्रतिलेख विश्लेषण: कोडिंग अनुक्रम (सीडीएस) और कार्यात्मक एनोटेशन की भविष्यवाणी

    ● एलएनसीआरएनए विश्लेषण: एलएनसीआरएनए और लक्ष्य की भविष्यवाणी

    ● माइक्रोसैटेलाइट पहचान (एसएसआर)

    बुस्को विश्लेषण

     

     图तस्वीरें26

     

    वैकल्पिक स्प्लिसिंग विश्लेषण

    图तस्वीरें27

    वैकल्पिक पॉलीएडेनाइलेशन विश्लेषण (एपीए)

     

     图तस्वीरें28

     

    उपन्यास प्रतिलेखों की कार्यात्मक व्याख्या

    图तस्वीरें29 

    इस विशेष प्रकाशन में BMKGene की नैनोपोर फुल-लेंथ mRNA अनुक्रमण सेवाओं द्वारा की गई प्रगति का पता लगाएं।

     

    मा, वाई. एट अल. (2023) 'नेमोपिलेमा नोमुराई विष पहचान के लिए पैकबायो और ओएनटी आरएनए अनुक्रमण विधियों का तुलनात्मक विश्लेषण', जीनोमिक्स, 115(6), पी। 110709. डीओआई: 10.1016/जे.वाईजीईएनओ.2023.110709।

    चाओ, क्यू. एट अल. (2019) 'पॉपुलस स्टेम ट्रांस्क्रिप्टोम की विकासात्मक गतिशीलता', प्लांट बायोटेक्नोलॉजी जर्नल, 17(1), पीपी. 206-219। डीओआई: 10.1111/पीबीआई.12958।

    डेंग, एच. एट अल. (2022) 'एक्टिनिडिया लैटिफोलिया (एक एस्कॉर्बेट-समृद्ध फल फसल) और एसोसिएटेड आणविक तंत्र के फलों के विकास और पकने के दौरान एस्कॉर्बिक एसिड सामग्री में गतिशील परिवर्तन', आणविक विज्ञान के अंतर्राष्ट्रीय जर्नल, 23(10), पी। 5808. डीओआई: 10.3390/आईजेएमएस23105808/एस1।

    हुआ, एक्स. एट अल. (2022) 'पेरिस पॉलीफिला में बायोएक्टिव पॉलीफिलिन में शामिल बायोसिंथेटिक पाथवे जीन की प्रभावी भविष्यवाणी', संचार जीवविज्ञान 2022 5:1, 5(1), पीपी 1-10। doi: 10.1038/s42003-022-03000-z.

    लियू, एम. एट अल. (2023) 'टुटा एब्सोल्यूटा (मेरिक) ट्रांसक्रिप्टोम और साइटोक्रोम पी450 जीन का संयुक्त पैकबियो आइसो-सेक और इलुमिना आरएनए-सेक विश्लेषण', कीड़े, 14(4), पी। 363. डीओआई: 10.3390/इंसेक्ट्स14040363/एस1।

    वांग, लिजुन एट अल। (2019) 'रिकिनस कम्युनिस में रिसिनोलेइक एसिड बायोसिंथेसिस की बेहतर समझ के लिए इलुमिना आरएनए अनुक्रमण के साथ संयुक्त पैकबायो एकल-अणु वास्तविक समय विश्लेषण का उपयोग करके ट्रांसक्रिप्टोम जटिलता का एक सर्वेक्षण', बीएमसी जीनोमिक्स, 20(1), पीपी 1-17। डीओआई: 10.1186/एस12864-019-5832-9।

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