SEQUCING MODE | Biblioteekgrutte | Teoretyske gegevensOpbringst (per sel) | IenbasisKrektens | Oanfregaasjes |
CLR | 20 kb, 30kb, ensfh. | 80 GB oant 130 GB | Sawat 85% | De Novo, SV Calling, ensfh. |
CCS | 15-20 kb | 14 oant 40 GB / sel (Sequel II) 70 oant 110 GB / Cell (REVIO) Hinget ôf fan 'e samples | Sawat 99% | De Novo, SNP / INDEL / SV CALLING, ISO-SEQ, |
Betingsten | Sequel II System | Revio-systeem | Ferheging |
Hegere tichtheid | 8 miljoen ZMWS | 25 miljoen zmws | 3x |
Unôfhinklike stadia | 1 | 4 | 4x |
Koarter run kearen | 30 oeren | 24 oeren | 1,25x |
30x hifi minsklike genomes / jier | 88 | 1.300 | 15x Oer it algemien |
● Mear dan 8 jier ûnderfining op Pacbio Sequencing Platfoarm mei tûzenen sletten projekten mei ferskate soarten.
● Folslein útrist mei de lêste Pacbio Sequencing Platplatformten, REVIO om foldwaande perquinsje te garandearjen.
● Fasters turn-Around Time, Hegere gegevens opleverje en krekteregegevens.
● Bydroegen yn hûnderten fan hege ynfloed fan hege ympuls-basearre publikaasjes.
Foarbyldtype | Tal | Konsintraasje (Qubbit®) | Folume | Suverens | Oaren |
Genomyske DNA | Ofhinklik fan gegevenseasken | ≥50 ng / μl | ≥15μl | Od260 / 280 = 1,7-2.2; Od260 / 230 = 1,8-2.5; Clear Peak op 260 NM,Gjin kontaminaasjes | Konsintraasje moat wurde mjitten troch qubit en Qubit / Nanopore = 0,8-2,5 |
Totaal RNA | ≥1.2μg | ≥120 ng / μl | ≥15μl | Od260 / 280 = 1,7-2.5; Od260 / 230 = 0.5-2.5;Gjin kontaminaasjes | Rin wearde ≥7.5 5 PROWS /S / 18s1 |
1. Ynskriuwe foar hûskema
Gegevens genereare út 63 CCS-sellen (fan 26 soarten)
DATA-Pacbio-CCS-15 KB | Trochsneed | Maks | Min | Mediaan |
Opbringst - Subreads (GB) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yiled - CCS (GB) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polymerase n50 | 145.651 | 175.430 | 118,118 | 144.689 |
SUBREADS NE50 | 17/6,509 | 23.924 | 12.485 | 17.584 |
CCS N50 | 14.490 | 19,034 | 9.876 | 14.747 |
Gemiddelde lingte-polymerase | 67.995 | 89,379 | 49.664 | 66,433 |
Gemiddelde lingte-subreads | 15.866 | 21,036 | 11,657 | 16.012 |
Gemiddelde lingte-ccs | 14.489 | 19,074 | 8.575 | 14.655 |
Gegevens genereare fan 16 CLR-sellen (fan 76 soarten)
Data-pacbio-clr-30kb | Trochsneed | Maks | Min | Mediaan |
Opbringst - Subreads (GB) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
Polymerase n50 | 39.456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
SUBREADS NE50 | 28,490 | 41.012 | 14.430 | 29,063 |
Gemiddelde lingte-polymerase | 22,063 | 48.886 | 8.747 | 21.555 |
Gemiddelde lingte-subreads | 17.720 | 27,225 | 8.293 | 17.779 |
2.Data QC - DemoStatistiken oer gegevensopjefte
Foarbyld | CCS LEADS NUM | Totaal CCS Bases (BP) | CCS lêst N50 (BP) | CCS gemiddelde lingte (BP) | CCS LANGEST LEAD (BP) | Subreads Bases (BP) | CCS-rate (%) |
PB_BMKXXXX | 3.444.159 | 54.164.122,586 | 15.728 | 15.726 | 36,110 | 863.326.330.465 | 6.27 |