Sekveneerimisrežiim | Raamatukogu suurus | Teoreetilised andmedSaagis (raku kohta) | ÜhebaasTäpsus | Rakendused |
CLR | 20kB, 30 kb jne. | 80 GB kuni 130 GB | Umbes. 85% | De novo, SV kutsumine jne. |
CCS | 15-20 kb | 14 kuni 40 GB/rakk (II järg) 70 kuni 110 GB/rakk (revio) Sõltub proovidest | Umbes. 99% | De novo, SNP/ANDEL/SV CALLING, ISO-SEQ, |
Tingimused | Järge II süsteem | Revio süsteem | Suurenemine |
Suurem tihedus | 8 miljonit ZMW -d | 25 miljonit ZMW -d | 3x |
Sõltumatud etapid | 1 | 4 | 4x |
Lühemad jooksuajad | 30 tundi | 24 tundi | 1,25x |
30x hifi inimese genoomid aastas | 88 | 1300 | 15x üldiselt |
● Üle 8 -aastase kogemuse Pacbio sekveneerimise platvormil, kus on tuhandeid suletud projekte erinevate liikidega.
● Täielikult varustatud uusimate Pacbio sekveneerimisplatvormidega Revio, et tagada piisav järjestus läbilaskevõime.
● Kiirem pöördeaeg, kõrgemad andmete saagised ja täpsemad andmed.
● Panustas sadades kõrge mõjuga Pacbio-põhistes väljaannetes.
Näidise tüüp | Summa | Kontsentratsioon (qubit®) | Maht | Puhtus | Teised |
Genoomne DNA | Sõltub andmete nõudest | ≥50 ng/μl | ≥15 μl | OD260/280 = 1,7-2,2; OD260/230 = 1,8-2,5 ; Selge tipp kiirusel 260 nm ,pole saastumist | Kontsentratsiooni tuleb mõõta QUBIT ja QUBIT/NANOPORE = 0,8-2,5 |
Kogu RNA | ≥1,2 μg | ≥120 ng/μl | ≥15 μl | OD260/280 = 1,7-2,5; OD260/230 = 0,5–2,5 ;pole saastumist | Rini väärtus ≥7,5 5≥28S/18S≥1 |
1. Maja andmete saagis
Andmed, mis on loodud 63 CCS rakult (26 liigist)
Andmed-PACBIO-CCS-15 KB | Keskmiselt | Maksimaalne | Min | Mediaan |
Saagis - alamjooksud (GB) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yled - CCS (GB) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polümeraasi N50 | 145,651 | 175,430 | 118,118 | 144 689 |
Alamjooks N50 | 17 509 | 23 924 | 12 485 | 17 584 |
CCS N50 | 14,490 | 19 034 | 9 876 | 14 747 |
Keskmine pikkuse polümeraas | 67,995 | 89,379 | 49,664 | 66,433 |
Keskmised pikkused | 15 866 | 21 036 | 11 657 | 16 012 |
Keskmine pikkus-ccs | 14,489 | 19 074 | 8 575 | 14 655 |
Andmed, mis on loodud 16 CLR -rakult (76 liigist)
Data-Pacbio-CLR-30KB | Keskmiselt | Maksimaalne | Min | Mediaan |
Saagis - alamjooksud (GB) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
Polümeraasi N50 | 39,456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
Alamjooks N50 | 28,490 | 41 012 | 14,430 | 29 063 |
Keskmine pikkuse polümeraas | 22 063 | 48 886 | 8 747 | 21 555 |
Keskmised pikkused | 17,720 | 27 225 | 8 293 | 17 779 |
2.Data QC - demoAndmete saagise statistika
Proov | CCS loeb num | CCS -i alused (BP) | CCS loeb N50 (BP) | CCS keskmine pikkus (BP) | CCS pikim lugemine (BP) | Alamreaside alused (BP) | CCS -i määr (%) |
PB_BMKXXX | 3,444,159 | 54,164,122,586 | 15 728 | 15 726 | 36,110 | 863,326,330,465 | 6.27 |