Exclusive Agency for Korea

条形 Bänner-03

Tooted

DNA/RNA sekveneerimine -PACBIO sekveneerija

PACBIO järjestamisplatvorm on pikalugemise järjestamise platvorm, mida tuntakse ka kui ühte kolmanda põlvkonna sekveneerimise (TGS) tehnoloogiat. Põhitehnoloogia, ühemolekuli reaalajas (SMRT), annab lugemiste genereerimise kümnete kilo-baasiga. „Sekveneerimise ja sünteesi” alusel saavutatakse ühe nukleotiidi eraldusvõime nullrežiimi lainejuhi (ZMW) abil, kus allosas on ainult piiratud maht (molekuli sünteesi koht). Lisaks väldib SMRT sekveneerimine suures osas järjestusspetsiifilisi eelarvamusi NGS-süsteemis, kuna raamatukogu ehitamise protsessis ei ole enamikku PCR-i võimendamise etappidest vaja.

 

Platvorm: järge II, Revio


Teenuse üksikasjad

Demo tulemused

Omadused

Kaks järjestusrežiimi Pacbio sekveneeril: pidev pikk lugemine (CLR) ja ringikujuline konsensus (CCS)

Sekveneerimisrežiim Raamatukogu suurus Teoreetilised andmedSaagis (raku kohta) ÜhebaasTäpsus Rakendused
CLR 20kB, 30 kb jne. 80 GB kuni 130 GB Umbes. 85% De novo, SV kutsumine jne.
CCS 15-20 kb

14 kuni 40 GB/rakk (II järg)

70 kuni 110 GB/rakk (revio)

Sõltub proovidest

Umbes. 99% De novo, SNP/ANDEL/SV CALLING, ISO-SEQ,

Revio ja järge II jõudluse ja tunnuste võrdlus

Tingimused

Järge II süsteem

Revio süsteem

Suurenemine

Suurem tihedus

8 miljonit ZMW -d

25 miljonit ZMW -d

3x

Sõltumatud etapid

1

4

4x

Lühemad jooksuajad

30 tundi

24 tundi

1,25x

30x hifi inimese genoomid aastas

88

1300

15x üldiselt

Teenuse eelised

● Üle 8 -aastase kogemuse Pacbio sekveneerimise platvormil, kus on tuhandeid suletud projekte erinevate liikidega.

● Täielikult varustatud uusimate Pacbio sekveneerimisplatvormidega Revio, et tagada piisav järjestus läbilaskevõime.

● Kiirem pöördeaeg, kõrgemad andmete saagised ja täpsemad andmed.

● Panustas sadades kõrge mõjuga Pacbio-põhistes väljaannetes.

Proovinõuded


Näidise tüüp Summa Kontsentratsioon (qubit®) Maht Puhtus Teised
Genoomne DNA Sõltub andmete nõudest ≥50 ng/μl ≥15 μl OD260/280 = 1,7-2,2;
OD260/230 = 1,8-2,5 ;
Selge tipp kiirusel 260 nm ,pole saastumist
Kontsentratsiooni tuleb mõõta QUBIT ja QUBIT/NANOPORE = 0,8-2,5
Kogu RNA ≥1,2 μg ≥120 ng/μl ≥15 μl OD260/280 = 1,7-2,5;
OD260/230 = 0,5–2,5 ;pole saastumist

Rini väärtus ≥7,5

5≥28S/18S≥1

 

Teenuse töövoog

proovi ettevalmistamine

Proovi ettevalmistamine

Raamatukogu ettevalmistamine

Raamatukogu ehitamine

Sekveneerimine

Sekveneerimine

Andmeanalüüs

Andmeanalüüs

Näidis QC

Projekti kohaletoimetamine


  • Eelmine:
  • Järgmine:

  • 1. Maja andmete saagis

    Andmed, mis on loodud 63 CCS rakult (26 liigist)

    Andmed-PACBIO-CCS-15 KB Keskmiselt Maksimaalne Min Mediaan
    Saagis - alamjooksud (GB) 421.12 544.27 221.38 426.58
    Yled - CCS (GB) 25.93 38.59 10.86 25.43
    Polümeraasi N50 145,651 175,430 118,118 144 689
    Alamjooks N50 17 509 23 924 12 485 17 584
    CCS N50 14,490 19 034 9 876 14 747
    Keskmine pikkuse polümeraas 67,995 89,379 49,664 66,433
    Keskmised pikkused 15 866 21 036 11 657 16 012
    Keskmine pikkus-ccs 14,489 19 074 8 575 14 655

    Andmed, mis on loodud 16 CLR -rakult (76 liigist)

    Data-Pacbio-CLR-30KB Keskmiselt Maksimaalne Min Mediaan
    Saagis - alamjooksud (GB) 142.20 291.40 50.55 142.49
    Polümeraasi N50 39,456 121,191 15,389 35,231
    Alamjooks N50 28,490 41 012 14,430 29 063
    Keskmine pikkuse polümeraas 22 063 48 886 8 747 21 555
    Keskmised pikkused 17,720 27 225 8 293 17 779

    2.Data QC - demoAndmete saagise statistika

    Proov

    CCS loeb num

    CCS -i alused (BP)

    CCS loeb N50 (BP)

    CCS keskmine pikkus (BP)

    CCS pikim lugemine (BP)

    Alamreaside alused (BP)

    CCS -i määr (%)

    PB_BMKXXX

    3,444,159

    54,164,122,586

    15 728

    15 726

    36,110

    863,326,330,465

    6.27

     

    Hankige pakkumine

    Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile

    Saada oma sõnum meile: