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mRNA-seq (NGS) con genoma de referencia

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mRNA-seq (NGS) con genoma de referencia

RNA-seq es una herramienta estándar en las ciencias de la vida y los cultivos, que cierra la brecha entre genomas y proteomas. Su fortaleza radica en descubrir nuevas transcripciones y cuantificar su expresión en un solo ensayo. Se usa ampliamente para estudios transcriptómicos comparativos, arrojando luz sobre genes relacionados con diversos rasgos o fenotipos, como comparar mutantes con tipos salvajes o revelar la expresión genética en condiciones específicas. La aplicación BMKCloud mRNA (Reference) integra la cuantificación de expresión, el análisis de expresión diferencial (DEG) y los análisis de estructura de secuencia en el proceso bioinformático mRNA-seq (NGS) y fusiona las fortalezas de software similar, garantizando conveniencia y facilidad de uso. Los usuarios pueden cargar sus datos de RNA-seq en la nube, donde la aplicación ofrece una solución de análisis bioinformático integral e integral. Además, prioriza la experiencia del cliente, ofreciendo operaciones personalizadas y adaptadas a las necesidades específicas de los usuarios. Los usuarios pueden establecer parámetros y enviar la misión del proceso por sí mismos, consultar el informe interactivo, ver datos/diagramas y completar la extracción de datos, como: selección de genes objetivo, agrupamiento funcional, diagramación, etc.

Resultados de la demostración
Minería de datos
Requisito de importación
Análisis principal
Referencia
Resultados de la demostración

Minería de datos

Requisito de importación

Plataforma:Illumina, MGI
Estrategia:Sec. de ARN
Disposición: Datos pareados y limpios.
Tipo de biblioteca:fr-unstranded, fr-firststrand o fr- secondstrand
Longitud de lectura:150 pb
Tipo de archivo:*.fastq, *.fq, *.fastq.gz o *.fq.gz. El sistemaempareje automáticamente los archivos .fastq según sus nombres de archivo,por ejemplo, *_1.fastq emparejado con *._2.fastq.
Número de muestras:No hay restricciones en el número.de muestras, pero el tiempo de análisis aumentará a medida que aumente el número delas muestras crecen.
Cantidad de datos recomendada:6G por muestra

Análisis principal
Los principales análisis y herramientas bioinformáticas de mRNA-seq (Referencia)tubería es la siguiente:
1. Control de calidad de datos sin procesar:
•Eliminación de secuencias de baja calidad, secuencias adaptadoras,etc;
•Herramientas: tubería desarrollada internamente;
2. Alineación de datos con un genoma de referencia:
•Alinear lecturas con un algoritmo con reconocimiento de empalme contra elgenoma de referencia.
•Herramientas:HISAT2, herramientas
3. Análisis de calidad de la biblioteca:
•Análisis de longitud de inserción, análisis de saturación de secuencia, etc.;
•Herramientas:herramientas;
4. Análisis de estructura de secuencia:
•Análisis de empalme alternativo, optimización de la estructura genética,predicción de genes novedosos, etc.;
•Herramientas:corbata, comparar, GATO,DIAMANTE, InterProScan, yHMMER.
5. Análisis de expresión diferencial:
•Detección DEG, análisis de correlaciones, funcional.enriquecimiento;
Varios resultados de visualización.;
RconSEGseq, DESeq2, ggplot2, DEXSeq
Referencia
1. Kim, Daehwan y cols. “Alineación del genoma basada en gráficos ygenotipado con HISAT2 y genotipo HISAT”.NaturalezaBiotecnología37 (2019): 907 - 915.
2. McKenna, Aaron y col. “El kit de herramientas de análisis del genoma: unaMarco MapReduce para analizar ADN de próxima generacióndatos de secuenciación”.investigación del genoma20 9 (2010): 1297-303.
3. Li, Heng y col. “El formato de alineación/mapa de secuencia yHerramientas SAM”.Bioinformática25 (2009): 2078 - 2079.
4. Perțea, Mihaela et al. “StringTie permite mejorarReconstrucción de un transcriptoma a partir de lecturas de RNA-seq”.NaturalezaBiotecnología33 (2015): 290-295.
5. Con cariño, Michael I. et al. “Estimación moderada del cambio de veces ydispersión para datos de RNA-seq con DESeq2”.genomaBiología15 (2014): n. pág.
6. Eddy, Sean R. "Búsquedas HMM de perfiles acelerados".PLoS Biología Computacional7 (2011): n. pág.

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