Modd Dilyniannu | Maint llyfrgell | Data damcaniaetholNghynnyrch | Un sylfaenNghywirdeb | Ngheisiadau |
Clr | 20kb, 30kb, ac ati. | 80 GB i 130 GB | Tua. 85% | De novo, Galw sv, ac ati. |
CCS | 15-20 kb | 14 i 40 Gb/cell (dilyniant II) 70 i 110 GB/Cell (Revio) Yn dibynnu ar y samplau | Tua. 99% | De novo, Snp/indel/sv galw, iso-seq, |
Nhelerau | System Dilyniant II | System Revio | Gynyddet |
Dwysedd uwch | 8 miliwn o ZMWs | 25 miliwn o ZMWs | 3x |
Camau annibynnol | 1 | 4 | 4x |
Amseroedd rhedeg byrrach | 30 awr | 24 awr | 1.25x |
30x hifi genomau dynol / blwyddyn | 88 | 1,300 | 15x yn gyffredinol |
● Dros 8 mlynedd o brofiad ar blatfform dilyniannu Pacbio gyda miloedd o brosiectau caeedig gyda rhywogaethau amrywiol.
● Wedi'i gyfarparu'n llawn â'r llwyfannau dilyniannu PACBIO diweddaraf, Revio i warantu trwybwn dilyniant digonol.
● Amser troi cyflymach, cynnyrch data uwch a data mwy cywir.
● Cyfrannwyd mewn cannoedd o gyhoeddiadau effaith uchel sy'n seiliedig ar Pacbio.
Math o sampl | Swm | Crynodiad (qubit®) | Nghyfrol | Burdeb | Eraill |
DNA Genomig | Dibynnu ar ofyniad data | ≥50 ng/μl | ≥15μl | OD260/280 = 1.7-2.2; OD260/230 = 1.8-2.5 ; Copa clir ar 260 nm ,dim halogiadau | Mae angen mesur crynodiad yn ôl qubit a qubit/nanopore = 0.8-2.5 |
Cyfanswm yr RNA | ≥1.2μg | ≥120 ng/μl | ≥15μl | OD260/280 = 1.7-2.5; OD260/230 = 0.5-2.5 ;dim halogiadau | Gwerth rin ≥7.5 5≥28S/18S≥1 |
Cynnyrch data 1.in-tŷ
Data a gynhyrchir o 63 o gelloedd ccs (o 26 rhywogaeth)
Data-Pacbio-CCS-15 KB | Chyfartaleddwch | Max | Mini | Ganolrif |
Cynnyrch - SiubReads (GB) | 421.12 | 544.27 | 221.38 | 426.58 |
Yiled - CCS (GB) | 25.93 | 38.59 | 10.86 | 25.43 |
Polymeras N50 | 145,651 | 175,430 | 118,118 | 144,689 |
Subreads N50 | 17,509 | 23,924 | 12,485 | 17,584 |
CCS N50 | 14,490 | 19,034 | 9,876 | 14,747 |
Hyd-polymeras ar gyfartaledd | 67,995 | 89,379 | 49,664 | 66,433 |
Hyd-subfreads ar gyfartaledd | 15,866 | 21,036 | 11,657 | 16,012 |
Hyd cyfartalog-ccs | 14,489 | 19,074 | 8,575 | 14,655 |
Data a gynhyrchir o 16 cell CLR (o 76 o rywogaethau)
Data-pacbio-clr-30kb | Chyfartaleddwch | Max | Mini | Ganolrif |
Cynnyrch - SiubReads (GB) | 142.20 | 291.40 | 50.55 | 142.49 |
Polymeras N50 | 39,456 | 121,191 | 15,389 | 35,231 |
Subreads N50 | 28,490 | 41,012 | 14,430 | 29,063 |
Hyd-polymeras ar gyfartaledd | 22,063 | 48,886 | 8,747 | 21,555 |
Hyd-subfreads ar gyfartaledd | 17,720 | 27,225 | 8,293 | 17,779 |
2.Data QC - DemoYstadegau ar Gynnyrch Data
Samplant | Mae CCS yn darllen num | Cyfanswm y seiliau CCS (BP) | Mae CCS yn darllen N50 (BP) | hyd cymedrig ccs (bp) | CCS Darllen Hiraf (BP) | SiBreads Canolfannau (BP) | Cyfradd CCS (%) |
Pb_bmkxxx | 3,444,159 | 54,164,122,586 | 15,728 | 15,726 | 36,110 | 863,326,330,465 | 6.27 |