● Zachycení poly mRNA před přípravou knihovny
● Volitelná příprava směrové knihovny mRNA umožňující získání sekvenačních dat specifických pro vlákno
● Bioinformatická analýza genové exprese a struktury transkriptu
●Rozsáhlá odbornost: Náš tým zpracoval v BMKgene přes 600 000 vzorků zahrnujících různé typy vzorků, jako jsou buněčné kultury, tkáně a tělesné tekutiny. Do každého projektu přinášíme bohaté zkušenosti a úspěšně jsme dokončili více než 100 000 projektů mRNA-Seq v různých oblastech výzkumu.
●Přísná kontrola kvality: Implementujeme základní kontrolní body ve všech fázích, od přípravy vzorků a knihoven až po sekvenování a bioinformatiku. Toto pečlivé monitorování zajišťuje poskytování trvale vysoce kvalitních výsledků a zajišťuje vám, že váš projekt je ve spolehlivých rukou.
●Obsáhlá anotace: Používáme více databází k funkční anotaci diferenciálně vyjádřených genů (DEG) a provádění odpovídajících obohacovacích analýz. Tento komplexní přístup poskytuje vhled do buněčných a molekulárních procesů, které jsou základem transkriptomové reakce, a zajišťuje, že budete plně informováni o výsledcích svého projektu.
●Poprodejní podpora: Náš závazek přesahuje dokončení projektu s 3měsíčním poprodejním servisem. Během této doby nabízíme sledování projektu, pomoc při odstraňování problémů a schůzky s otázkami a odpověďmi, abychom mohli odpovědět na jakékoli dotazy související s výsledky.
Knihovna | Strategie sekvenování | Doporučené údaje | Kontrola kvality |
Obohaceno o Poly A | Illumina PE150 DNBSEQ-T7 | 6-10 Gb | Q30≥85 % |
Nukleotidy:
Konc. (ng/μl) | množství (μg) | Čistota | Integrita | |
Standardní knihovna | ≥ 10 | ≥ 0,2 | OD260/280=1,7-2,5 OD260/230 = 0,5-2,5 Omezená nebo žádná kontaminace proteiny nebo DNA na gelu. | Pro rostliny: RIN≥4,0; Pro zvířata: RIN≥4,5; 5,0≥28S/18S≥1,0; omezená nebo žádná základní elevace |
Směrová knihovna | ≥ 10 | ≥ 0,2 | OD260/280=1,7-2,5 OD260/230 = 0,5-2,5 Omezená nebo žádná kontaminace proteiny nebo DNA na gelu. | Pro rostliny: RIN≥4,0; Pro zvířata: RIN≥4,5; 5,0≥28S/18S≥1,0; omezená nebo žádná základní elevace |
● Rostliny:
Kořen, stonek nebo okvětní lístek: 450 mg
List nebo semena: 300 mg
Ovoce: 1,2 g
●Zvíře:
Srdce nebo střevo: 300 mg
Vnitřnosti nebo mozek: 240 mg
Sval: 450 mg
Kosti, vlasy nebo kůže: 1 g
● Členovci:
Hmyz: 6 g
Korýš: 300 mg
● Plná krev: 1 trubka
● Buňky: 106 buňky
Nádoba: 2 ml centrifugační zkumavka (nedoporučuje se cínová fólie)
Označení vzorků: Skupina+replikace např. A1, A2, A3; B1, B2, B3......
Zásilka:
1. Suchý led: Vzorky je třeba zabalit do sáčků a zahrabat do suchého ledu.
2. Stolní zkumavky RNA: Vzorky RNA lze sušit ve zkumavce pro stabilizaci RNA (např. RNAstable®) a přepravovat při pokojové teplotě.
Bioinformatika
Eukaryotické Pracovní postup analýzy sekvenování mRNA
Bioinformatika
ØKontrola kvality nezpracovaných dat
ØReferenční zarovnání genomu
ØAnalýza struktury přepisu
ØKvantifikace exprese
ØDiferenciální expresní analýza
ØAnotace a obohacení funkcí
Referenční zarovnání genomu
Sytost dat
Korelace vzorků a hodnocení biologických replikátů
Diferenciálně vyjádřené geny (DEGs)
Funkční anotace stupňů
Funkční obohacení stupňů
Prozkoumejte pokroky, které umožňují eukaryotické služby sekvenování mRNA NGS BMKGene prostřednictvím kurátorské sbírky publikací.
Huang, L. a kol. (2023) „Triclosan a triclocarban oslabují čichovou kapacitu zlatých rybek tím, že omezují rozpoznávání pachů, narušují transdukci čichového signálu a ruší zpracování čichových informací“, Water Research, 233, str. 119736. doi: 10.1016/J.WATRES.2023.119736.
Jia, LJ a kol. (2023) 'Aspergillus fumigatus unese lidský p11, aby přesměroval fagozomy obsahující houby do nedegradativní dráhy', Cell Host & Microbe, 31(3), str. 373-388.e10. doi: 10.1016/J.CHOM.2023.02.002.
Jin, K. a kol. (2022) 'TCP transkripční faktory zapojené do vývoje výhonků Ma Bamboo (Dendrocalamus latiflorus Munro)', Frontiers in Plant Science, 13, s. 884443. doi: 10.3389/FPLS.2022.884443/BIBTEX.
Wen, X. a kol. (2022) 'Genom Chrysanthemum lavandulifolium a molekulární mechanismus, který je základem různých typů capitulum', Horticulture Research, 9. doi: 10.1093/HR/UHAB022.
Zhang, Yujie a kol. (2023) „Kaskádový nanoreaktor pro posílení sonodynamické terapie kolorektálního karcinomu prostřednictvím synergického rozšíření ROS a autofagické blokády“, Nano Today, 49, str. 101798. doi: 10.1016/J.NANTOD.2023.101798.