Takagi et al., U Ghjurnale di a Spegna, 2013
● localizazione precisa: mischjà bulche cù 30 + 30 à 200 + 200 individui per minimizà u rumore di fondo; PREDICZIONE NOTIMINATICA DI MUTIMU DI MUTIMU.
● Analisi Comprensiva: In profonda candidata per l'anno di funzione gene, cumprese nr, SwissProt, vai, Kegg, COG, kog, etc.
● Tempu di fornitu più veloce: u rapidu gene localizazione in 45 ghjorni di travagliu.
● Esperienza estensiva: BMK hà cuntribuitu in millaie di tagliati in località, copre diversa cume culturi, prudutti aquatici, fiori, frutti, etc.
Pupulazione:
Segregating Progeny di i genitori cù fenotipi opposti.
EG F2 PROGENY, BACKCROSSTING (BC), Linea Inbred Rincominante (Ril)
Piscina mixing
Per i tratti Qualificativi: 30 à 50 individui (minimu 20) / ingrossu
Per TRatis quantitative: Top 5% à 10% individui cù fenotipes estremi in tutta a pupulazione (minimu 30 + 30).
Prufundità di sequenza cunsigliata
Almenu 20x / Parent è 1x è di a prole di u mischju di u mischju di 30 + 30 individuali, a prufundità di sequenza serà 30x per ingrossa)
● u Genoma di Genomi
● Processazione di dati
● SNP / Induve chjama
● Screening Regione Candidata
● Funzione di a funzione Gene à Candidate
Nucleotidi:
Sample GDNA | Mostra di tessulu |
CONCENTRAZIONE: ≥30 ng / μl | Piante: 1-2 g |
Quantità: ≥2 μg (volunno ≥15 μl) | Animali: 0,5-1 G |
Purità: Od260 / 280 = 1.6-2,5 | Sangue sanu: 1,5 ml |
1. Basioni analisi di 1. Se follà a distanza euclidiana (ED) per identificà a regione di u candidatu. In a seguente figura
X-AXIS: Numeru di cromosoma; Ogni puntu rapprisenta un valore ed di un snp. A linea negra currisponde à u valore di l'addombu. Un valore più altu indica una associazione più significativa trà u situ è u fenotipu. A Linea di Dash Rossa rapprisenta a soglia di l'associu significativu.
L'analisi di 2,avantazioni basatu senza un indice snp
X-AXIS: Numeru di cromosoma; Ogni puntu rapprisenta u valore di l'indice snp. A linea negra ferma per u valore di l'indice snp adattatu. U valore più grande hè, u più significativu l'associu hè.
Casu BMK
U Major-EXC..0 FNL7.1 codificate una proteina abbundante abbundante assuciata cù a lunghezza di u collu di frutti in Cucumber
Publicatu: Plant Neachottnology Journal, 2020
Strategia Sequencing:
Genitori (jin5-508, Yn): Generale di Genome di u geniu di 34 × è 20 ×.
DNA Pooles (50 - Anziatu è 50 cuncricutu è 50 più pocu di dicurità): Scancimentu di 61 × è 52 ×
Risultati chjave chjave
In stu studiu, a pupulazione segregata (F2 è F2: 3) hè stata generata da attraversà u paturu di u pulizzeru di u paturu à longu u collu Dui piscine DNA sò stati custruiti da 50 individui di longa estrema longa è 50 estremi di u collu Mai-Effettu QTL hè statu identificatu nantu à u chr07 da l'analisi di BSA è a cartografia di QTL tradiziunale. A regione di u Candidata era più strettu down in messe-mazona di gene espressivi è esperimenti transressivi, chì revuenu a genua chjave in cuntrullandu u collu, csfnl7.1. Inoltre, polimorfisimu in csfnl7.1 Regione Promotter hè stata trovata per esse assuciata cun espressione currispondente. L'analisi fisicinetici più suggerì chì Fnl7.1 Locanu hè assai prubabile di esse originata da l'India.
![]() Qtl-mapping in l'analisi di BSA per identificà a regione di u candidatu assuciatu à a lunghezza di u collu | ![]() LOGFT PROFILLI DI U CUCCU U BLACK-DENNU SKLY Identificatu nantu à u CHR07 |
Xu, X., et al. "L'effettu tutale tutale fnitativu fnitativu fnl7.1 Codificate l'embrugeni di a Proteina abbundante assuciata cù a lunghezza di u collu di fruttu in Cucumber." Plant journovia di biotechnologia 18,7 (2020).